Comparación de Trypanosoma cruzi de diferente procedencia epidemiológica para el inmunodiagnóstico de la enfermedad de Chagas

RESUMEN

En el inmunodiagnóstico de la infección por Trypanosoma cruzi se usan rutinariamente antígenos obtenidos de cepas o clones sin tomar en consideración su procedencia epidemiológica (humano, vector, reservorio), aún cuando existen evidencias indicando posibles relaciones entre aislados del parásito y manifestaciones clínicas de la enfermedad. El objetivo del estudio fue determinar el perfil de bandas inmunoreactivas en los aislados de T. cruzi de fuentes epidemiológicas diferentes (humano, vector, reservorio) empleando sueros de pacientes en fase aguda y crónica de la enfermedad. Se trabajó con epimastigotas de tres aislados diferentes y un antígeno comercial. Los perfiles proteicos y glicoproteicos se analizaron mediante SDS-PAGE y tinciones específicas. Los perfiles de bandas inmunoreactivas se estudiaron por inmunotransferencia con una mezcla de sueros de pacientes chagásicos agudos y crónicos. Los resultados mostraron diferencias proteicas entre parásitos mantenidos en cultivo (cepa comercial) y los mantenidos por pases alternos triatomino/ratón, pero no se registraron diferencias asociadas a la procedencia epidemiológica de los parásitos, quienes mostraron idéntico perfil. A nivel de glicoproteínas sólo se revelaron cambios en la intensidad asociado al esquema de mantenimiento. Las inmunotransferencias de sueros de pacientes en fase aguda y crónica discriminaron entre parásitos con diferente esquema de mantenimiento, pero solo los sueros agudos discriminan según la procedencia epidemiológica. Este trabajo confirma la existencia de bandas inmunoreactivas asociadas a la procedencia epidemiológica de los aislados que pudiesen ser de utilidad inmuno-profiláctica. Se recomienda estudiar si los problemas diagnósticos de pacientes dudosos podrían estar asociados a la calidad del antígeno según su esquema de mantenimiento y procedencia epidemiológica.

ABSTRACT

In the immunodiagnosis of Trypanosoma cruzi infection, antigens obtained from strains or clones are routinely used without taking into consideration their epidemiological origin (human, vector, reservoir), even when there are evidences indicating possible relationships between parasite isolates and clinical manifestations of the disease. The objective of this study was to determine the profile of immunoreactive bands in T. cruzi isolates from different epidemiological sources (human, vector, reservoir) using sera from patients in acute and chronic phase of the disease. We worked with epimastigotes of three different isolates and a commercial antigen. Protein and glycoprotein profiles were analyzed by SDS-PAGE and specific stains. The profiles of immunoreactive bands were studied by immunoblotting with a mixture of sera from acute and chronic chagasic patients. The results showed protein differences between parasites maintained in culture (commercial strain) and those maintained by alternating triatomine/mouse passes, but no differences were found associated to the epidemiological origin of the parasites, which showed the same profile. At the glycoprotein level, only changes in the intensity associated with the maintenance scheme were revealed. Immunoblotting of sera from acute and chronic patients discriminated between parasites with different maintenance schemes, but only acute sera discriminated according to epidemiological origin. This work confirms the existence of immunoreactive bands associated with the epidemiological origin of the isolates that could be useful for immuno-prophylaxis. It is recommended to study if the diagnostic problems of doubtful patients could be associated to the quality of the antigen according to its maintenance scheme and epidemiological origin.