ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИММУНОГРАММ В ДИАГНОСТИКЕ ОСТРОЙ МЕЗЕНТЕРИАЛЬНОЙ ИШЕМИИ

Актуальность. Изучение патофизиологических реакций развивающихся при острой мезентериальной ишемии, с последующим созданием новых способов диагностики и методов лечения этой патологии является актуальной проблемой хирургии.

Цель исследования: оценка возможности использования иммунограмм в диагностике острой мезентеральной ишемии.

Материалы и методы: содержание животных и постановка экспериментов проводилась в соответствии с требованиями приказов № 1179 МЗ СССР от 11.10.1983 года и № 267 МЗ РФ от 19.06.2003 года, а также международных рекомендаций «Guide for the Care and Use of Laboratory Animals». В работе с обследуемыми лицами соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинкской Декларацией Всемирной Медицинской Ассоциации (World Medical Association Declaration of Helsinki 1964, 2013 г.).

В связи с поставленной целью нами был проведен эксперимент на 24 взрослых крысах – самцах средней массой 200 гр. Животные были разделены на 3 группы. Всем животным под общим обезболиванием выполнялась лапаротомия, забор крови из задней полой вены, перевязка брыжеечной артерии в основании корня брыжейки, ушивание раны. Через 3, 6 и 8 часов соответственно в 1, 2 и 3 группах выполнялась релапаротомия, забор крови, биопсия кишки и вывод животного из эксперимента. Забор крови осуществляли в пробирку BD Vacutainer с гепарином лития.

Оценку субпопуляционной структуры лимфоцитов крови экспериментальных животных осуществляли стандартным методом прямого иммунофлюоресцентного окрашивания цельной крови с использованием панели моноклональных антител IOTest Anti-Rat (Beckman Coulter), пациентов – с использованием панели моноклональных антител tetraCHROME™ и IOTest (Beckman Coulter). Морфологический материал подвергался стандартной проводке, полученные препараты окрашивали гематоксилин – эозином.

Полученные данные обработаны непараметрическими методами статистики. Для показателей определялись медиана (Ме), 75-й и 25-й перцентили (75-й; 25-й). Сравнение медиан выборок осуществляли по критерию Уилкиксона. Различия величин признавали статистически значимыми при критическом уровне р≤0,05. В качестве клинического примера приведены результаты обследования 6 пациентов с острой мезентериальной ишемией, находившихся на лечении в отделении общей хирургии НУЗ «Дорожная клиническая больница на ст. Чита II» ОАО РЖД, г. Чита.

Результаты исследований и их обсуждение. Расчет изучаемых показателей с проведением одновременного морфологического исследования стенки тонкой кишки показал следующее. В условиях острой необратимой ишемии кишечника наблюдается прогрессивное снижение общего числа лимфоцитов венозной крови с развитием дисбаланса в их субпопуляции, увеличение соотношения CD4/CD8. Установлено, что содержание лимфоцитов венозной крови находится в прямой зависимости от времени ишемии кишечника. При моделировании острой необратимой мезентериальной ишемии максимальное снижение общего числа лимфоцитов отмечается в некротическую стадию заболевания.

Основываясь на полученных в результате эксперимента данных, нами были изучены некоторые показатели клеточного иммунитета пациентов с диагнозом острая мезентериальная ишемия. При этом оценивалась полная клинико-лабораторная картина с учетом иммунограммы. Выявлено, что течение заболевания сопровождается снижением общего числа лимфоцитов преимущественно за счет CD4 клеток. Некротическая стадия заболевания характеризовалась снижением абсолютного числа лимфоцитов на 65% и более, абсолютного числа CD8 клеток на 80% наряду с ростом соотношения CD4/CD8, что соответствует экспериментальным данным.

Рекомендации. В комплексное обследование больных с острой мезентериальной ишемией следует включать определение субпопуляции лимфоцитов венозной крови. Для прогнозирования тяжести заболевания, прогрессирование некроза кишки в послеоперационном периоде следует в динамике определять относительное и абсолютное число лимфоцитов, CD4, CD8- клеток, соотношение CD4/CD8. Прогрессирующее снижение общего числа лимфоцитов, CD8- клеток с ростом соотношения CD4/CD8 свидетельствуют о течении заболевания. При снижении абсолютного числа лимфоцитов более чем на 65%, абсолютного числа CD8- клеток на 80% наряду с ростом соотношения CD4/CD8 следует заподозрить стадию некроза острой мезентериальной ишемии.

Сведения об авторах:

Артамонова Зоя Александровна, преподаватель ГБОУ ВО Читинской государственной медицинской академии; e-mail: zoyaartamonova@mail.ru;

Игольников Е.Л., врач ГУЗ "Борзинская центральная районная больница".