Bioseguridad en la utilización del bromuro de etidio en los laboratorios de biología molecular
Authors/Creators
- 1. Investigador Unidad de Biotecnología Vegetal - Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas, Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (INIA-CENIAP). Maracay-Venezuela
- 2. Docente e Investigador de la Facultad de Ingeniería, Escuela de Procesos Industriales, Universidad Central de Venezuela (UCV). Cagua-Venezuela
Description
Resumen
El bromuro de etidio C21H20N3Br (bromuro de 3,8-diamino-5-etil-6-fenilfenantridina), comúnmente conocido como BrEt, es un agente intercalante no reactivo, utilizado en laboratorios de biología molecular como marcador para la identificación y visualización de bandas de ácidos nucleicos. El BrEt se adhiere a las moléculas de ácido nucleico, provocando un contraste entre el gel y las bandas, que en presencia de luz ultravioleta emite una luz rojo – naranja. Aunque el BrEt es un agente tóxico clasificado como mutagénico, sospechoso de ser teratógeno y carcinógeno, se usa ampliamente en laboratorios de biología molecular a concentraciones bajas (0,01 µg.mL-1). Además, es de menor costo, en comparación con otros productos de acción similar, como Sybr Safe (Invitrogen®), Gel Red (Biotum®) o verde Midori (NipponGenetics®). Como cualquier sustancia de naturaleza química compleja, requiere de la formación adecuada del personal técnico e investigadores para su uso y conocimiento de las normas de seguridad necesarias en su manipulación, almacenamiento y disposición final. Por tanto, el objetivo de este trabajo fue proporcionar una información inicial del BrEt para que las personas que emplean este producto químico, puedan planificar estrategias de higiene, prevención, bioseguridad, salud y seguridad laboral en los laboratorios de biología molecular.
Abstract
Ethidium bromide C21H20N3Br (3,8-diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridine bromide), commonly known as BrEt, is a non-reactive intercalating agent, used in molecular biology laboratories as a marker for the identification and visualization of nucleic acids bands. BrEt adheres to nucleic acid molecules, causing a contrast between the gel and the bands, which in the presence of ultraviolet light emits a red-orange light. Although BrEt is a toxic agent classified as mutagenic, suspected of being teratogenic and carcinogenic, is widely used in molecular biology laboratories at low concentrations (0,01 µg.mL-1). In addition, it is lower in cost compared to other products of similar action, such as Sybr Safe (Invitrogen®), Gel Red (Biotum®) or Midori green (NipponGenetics®). Like any substance of a complex chemical nature, it requires the adequate training of technical personnel and researchers for its use and knowledge of the safety standars necessary for its handling, storage and final disposal. Therefore, the objective of this work was to provide initial information about BrEt, so that people who use this chemical product can plan hygiene, prevention, biosafety, health and occupational safety strategies in molecular biology laboratories.
Files
2021_040202.pdf
Files
(406.1 kB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:3e620ecd5b9c53bb6682893fd4a108fc
|
406.1 kB | Preview Download |
Additional details
References
- Bromuro de Homidio. Pub Chem. NCBI, NLM, NIH de EE.UU. CID.14710.obtenida 8 de Junio2021 de: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/
- Burdano Rosero, E.M., Gaetano de Almeida, B., Otero Ramírez, I.D., Álvarez, S.L. (2017). Manual de Biología Molecular: Procedimientos Básicos. Universidad de Nariño. https://www.researchgate.net/profile/Edith-Burbano-Rosero/publication/326905291_Manual_de_Biologia_Molecular-Procedimientos_Basicos/links/5b7de35292851c1e12291a22/Manual-de-Biologia-Molecular-Procedimientos-Basicos.pdf.
- Chávez López, S. (2018). El concepto de riesgo (The risk concept). Revista Recursos Naturales y Sociedad, 4(1), 32-52. https://doi.org/10.18846renaysoc.2018.04.04.01.0003.
- Comisión Venezolana de Normas Industriales (COVENIN). 2000. Sistema de gestión de seguridad e higiene ocupacional (SGSHO). Normas para su aplicación. Fondo Nacional para la Normalización (FONDONORMA). 31 p.
- Díaz Zazo, P. M. (2015). Prevención de riesgos laborales: Seguridad y salud laboral. (2º ed). Paraninfo.
- Facultad de Ciencias Universidad de Chile 2008. Guía para la eliminación de residuos líquidos.
- Gracia Hernández, V. (2009). Desarrollo y validación de nuevas metodologías para la caracterización de la Interacción de ligandos con ADN. Estudio de la unión de cromóforos catiónicos heteroaromáticos con potencial intercalante. [Tesis doctoral, Universidad de Alcalá]. https://core.ac.uk/download/pdf/58906986.pdf.
- Iglesias-Osores, S. (2019). Bromuro de etidio: ¿agente mutágeno en el laboratorio? Revista del Cuerpo Médico del Hospital Nacional Almanzor Aguinaga Asenjo, 12(3), 243 - 244. https://doi.org/10.35434/rcmhnaaa.2019.123.539.
- Instituto Nacional de Seguridad y Salud en el Trabajo. (2013). Situaciones de exposición a agentes químicos [Archivo PDF]. https://www.insst.es/documents/94886/791398/BASEQUIM_012_0.pdf/7e56e4a0-27bc-460e-81bf-78df7295e246?t=1606302592488.
- International Labour Organization (ILO). (2021). Límites de Exposición Química. Obtenida 8 de Junio 2021. https://www.ilo.org/safework/info/publications/WCMS_151534/lang--en/index.htm.
- Ley sobre sustancias, materiales y desechos peligrosos. (2001). Art. 1, 2. 13 de noviembre de 2001. Gaceta Oficial de la República de Venezuela N° 5554. http://www.sudeban.gob.ve/wp-content/uploads/MarcoLegal/GO5554.pdf.
- Lunn, G., Sansone, E. B. (1987). Ethidium Bromide: Destruction and decontamination of solutions. Analytical Biochemistry, 162 (2), 453-458. https://doi.org/10.1016/0003-2697(87)90419-2.
- Martínez, R., Chacon-Garcia, L. 2005. The search of DNA – intercalators as antitumoral drugs: what it worked and what did not Word. Curr Med Chem., 12(2), 51-127.
- Organización Internacional del Trabajo. (2017). Inspección de seguridad en el trabajo: Módulo de formación para inspectores. (1º ed). https://www.ilo.org/wcmsp5/groups/public/---americas/---ro-lima/---ilo-buenos_aires/documents/publication/wcms_592318.pdf.
- Pastor Blazquez, V., Moreno, M., Palazón, R., Martin, E. y Martin, P. 2007. Riesgos cancerígenos, mutágenos y químicos en los centros educativos de la Comunidad de Madrid. https://cancerceroeneltrabajo.ccoo.es/b4268f6d29bd068e776f8d7b09d24630000001.pdf.
- Pavelic, K., Beerman, T. A, Bernacki, R. J. (1985). An evaluation of the effects of combination chemotherapy in vitro using DNA-reactive agents. Cancer Drug Delivery, 2(4), 255-270. https://doi.org/10.1089/cdd.1985.2.255
- Presidencia de la República. (1998, 3 de agosto). Decreto 2635. Normas para el control de la recuperación de materiales peligrosos y el manejo de los desechos peligrosos. Gaceta Oficial Extraordinaria Nº 5245 de la República Bolivariana de Venezuela.
- Sigma-Aldrich. 2006. Ficha de seguridad Ethidium Bromide.
- Torres González, J; Araujo Alvarez, M; Rojas Alegria, A.M. (2011). Diagnostico situacional sobre riesgos químicos en laboratorios de investigación, propuesta de atención y prevención [Tesis Maestría, Instituto Politécnico Nacional]. http://www.repositoriodigital.ipn.mx/handle/123456789/16204.
- Universitat Politécnica de Valencia. 2012. Servicio integrado de prevención y salud laboral.
- Uribe Echeberry, P. T., Herrera Cañón, J. C., Orozco Clavijo, N. J., Betancur Pérez, J. F. (2013). Uso alternativo de colorante Gelred en la tinción de ácidos nucleicos. Archivos de Medicina, 13(2), 160-166. https://www.redalyc.org/pdf/2738/273829753005.pdf.
- Von Wurmb-Schwark, N., Cavelier, L., Cortopassi, G.A. (2006). A low doce of Ethidium bromide leads to an increase of total mitochondria DNA while higher concentrations induce the mtDNA 4997 deletion in human neuronal cell line. Mutation Research/Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis, 596 (1-2), 57-63. https://doi.org/10.1016/j.mrfmmm.2005.12.003.
- Watkins, T. I. (1952). Trypanosides of the phenanthridine series. Part I. The effect of changing the quaternary grouping in dimidium bromide. Journal of the Chemical Society, 3052-3064. https://doi.org/10.1039/JR9520003059.