Diagnóstico genético del polimorfismo en citocromo P450 mediante ensayo de PCR múltiplex (Práctica en laboratorio virtual Cibertorio)

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es

Se habla de diversidad genética de los individuos como el resultado de que, en diversas regiones del genoma, unas personas tenemos secuencias de nucleótidos que nos diferencian de otras; esto se denomina polimorfismo genético. Cuando estas regiones polimórficas corresponden a zonas codificantes de un producto, existen consecuencias funcionales.

La superfamilia enzimática citocromo P450 juega un papel crucial en el metabolismo de numerosos fármacos y de otros compuestos xenobióticos. El polimorfismo existente en los genes de estas enzimas hace que la respuesta a los fármacos sea diferente entre individuos.

En concreto, este ensayo se centra en el polimorfismo genético de la isoforma CYP2C9. La diferencia entre los alelos presentes en distintos individuos puede detectarse utilizando PCR con cebadores específicos para cada alelo. A continuación, los segmentos amplificados se analizan mediante electroforesis.

Objetivo: Empleando cebadores específicos para algunos de los alelos más frecuentes, analizar el genotipo de varios pacientes. Se parte de muestras de DNA de los pacientes, se realiza la amplificación por PCR múltiplex y se separan los segmentos amplificados mediante electroforesis.