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À l'âge de 16 ans, Isabella Leonarda entre au Collegio di Sant'Orsola, un couvent d'Ursulines, où elle apprend la musique. Elle devient mère supérieure en 1686, et à partir de 1696, elle est nommée madre vicaria.
Leonarda écrivit plus de 200 œuvres. Son premier recueil est contenu dans la collection de Gasparo Casati, qui fut le maître de chapelle de Novare. Le genre musical privilégié par Isabella Leonarda est le motet pour soliste particulièrement bien adapté à son style. Ses œuvres sont réparties en 20 opus. Il est probable qu'elle écrivit beaucoup des textes qu'elle a illustrés de sa musique. Elle a aussi composé des messes, des psaumes et des sonates, utilisant parfois les violons dans les messes et les motets pour supporter les voix. Ses œuvres utilisent un vocabulaire harmonique riche et étendu, occasionnellement elle utilise des vocalises dans les sections des alleluia extatiques.
