En 5 veckor gammal, helt vit husky-korsningspojke fördes till University of Saskatchewans veterinärmedicinska centrums (VMC) akutmottagning med en dagars historia av onormalt neurologiskt beteende som inkluderade att hunden gick runt i cirklar, ataxi, vokalisering och en förvirrad mental status. Vid presentation hade hunden en förvirrad mental status, bilateralt hot var frånvarande, normal pupillär ljuseffekt noterades, gagreflex var närvarande och inga andra kranialnerv-brister noterades. Hunden gick runt i cirklar till vänster och hade en ataxi-gång. Det fanns inga andra signifikanta neurologiska fynd. Neuroanatomiskt var lokaliseringen av skadorna antyda på multifokala centrala nervsystem-skador inom främre hjärnbark och hjärnstam. Det lokala djurskyddsorganet hade tagit emot dammen och hennes 8 valpar från norra Saskatchewan; mamman vaccinerades vid ankomsten till skyddet. Valparna vaccinerades därefter sju dagar senare med ett modifierat levande vaccin (Nobivac 1 DAPPC, Merck Animal Health) efter att alla valpar hade testats negativa för hundparvovirus med ett enzym-kopplat immunosorbent-test (SNAP Parvo test, IDEXX Laboratories, Markham, ON). Alla andra valpar och mamman var asymptomatiska med undantag för en valpkamrat som presenterades för VMC en dag före den valp som rapporterades här med en 3-dagars historia av letargi, ökad andningsinsats och bilateral serös näsutsöndring. En infektion i övre luftvägarna misstänktes. Amoxicillin (Apotex Inc.; Toronto; ON) 22 mg/kg PO q12 i 10 dagar ordnades och valpen skrevs ut med instruktioner att omedelbart avvänjas från mamman och isoleras från de andra valparna. Inga neurologiska avvikelser noterades i detta eller i någon av de andra valparna vid någon tidpunkt. Denna valp placerades i isolering vid ankomsten på grund av misstanke om en underliggande infektiös sjukdom, inklusive möjlig hundsjuka. Samtycke erhölls från det lokala djurskyddsorganet för att utföra diagnostik och ge stödjande vård. Normosol R (Hospira, Montreal, QC) vätskor gavs intravenöst med 4 ml/kg/tim. Analgesi gavs med hydromorfon (Sandoz Inc., Boucherville, QC) 0,05 mg/kg IV q4. En akutpanel visade ett packat cellvolym på 22 % (26,5–35,5), totalt protein på 5,8 g/dl (3,7–4,8), Azotstick® (Siemens Healthcare Diagnostics Inc., Tarrytown, NY) blod urea nitrogen på 5-15 mg/dl (13,1–46,2) och blodglukos på 10,3 mmol/l (6,7–8,9). Ett komplett blodtal lämnades också till Prairie Diagnostic Services Inc. (PDS), som visade en måttlig regenerativ anemi; RBC-tal (röda blodkroppar) 3,25 × 1012/L (5,8–8,5) och hematokrit (HCT) 0,22 L/L (0,39–0,56). En måttlig vänsterskift med toxiska förändringar som indikerar akut inflammation noterades också; vita blodkroppar (WBC) 10,7 × 109/L (4,9–15,4), segmenterade neutrofiler 8,0 × 109/L (3,0–10,0) och band 1,0 × 109/L (0,0–0,1). Blodprovsresultaten inkluderade åldersspecifika referensintervall som var relevanta för denna patient []. Inledande differentialdiagnoser för de neurologiska tecknen inkluderade hundinfluensa, bakteriell meningit, protozoal meningit (t.ex. toxoplasmos) och mindre sannolikt en möjlig ovanlig manifestation av rabies. Symtomatisk behandling med bredspektrumantibiotika initierades och inkluderade Metronidazole (Baxter, Mississauga, ON) 25 mg/kg IV q12, Piperacillin (SteriMax Inc., Oakville, ON) 40 mg/kg IV långsamt under 30 min q6, och avsikten att administrera Clindamycin (Intervet, Kirkland, QC) 12,5 mg/kg PO q12. Clindamycin kunde inte administreras eftersom valpen snabbt förlorade sin gagreflex när hans mentation gradvis försämrades inom de första 4 timmarna efter presentationen. Valpen förlorade och återfick medvetandet varje minut och blev inte responsiv till yttre stimuli. Efter ytterligare diskussion med det lokala djurskyddsorganet beslutades det av djurskyddsskäl och en misstänkt dålig prognos att avliva valpen. Valpen avlivades med intravenös Pentobarbital (Bimeda-MTC, Cambridge, ON) 2 ml/4,5 kg; döden bekräftades genom hjärtljud. Inget ytterligare bedövningsmedel krävdes på grund av valpens förvirrade mentation. Valpen avlivades 18 timmar efter att kliniska tecken först noterades. En obduktion utfördes dagen därpå på Prairie Diagnostic Services (PDS), Saskatoon, Saskatchewan. Valpen var i god kroppslig kondition. Signifikanta bruttofynd var ödematösa, fläckiga rosa till blekrosa lungor och en diffust förstorad, blekbrun lever. Inget ödem i gallblåsan noterades. Histopatologi utfördes på större organ inklusive hjärna (cerebrum, thalamus, cerebellum, pons, medulla), lungor, hjärta, lever, mjälte, ögon, benmärg, njurar, lymfkörtlar och tunntarm. Områden med hypercellularitet i hjärnan centrerad på kärl och åtföljd av akut blödning observerades särskilt i corona radiata, caudate nucleus, thalamus, pons och leptomeninges. Kärl var omgivna och infiltrerade av makrofager och detta var associerat med ödem, små mängder fibrin, nekrotiska inflammatoriska celler och blödning i Virchow-Robbin-utrymmet och den intranukleära neuropilen. Några makrofager visade erytrofagi. Endotelceller var hypertrofierade och innehöll ofta en stor basofil intranukleär inklusionskropp. Hepatocyter var diffust, milt vakuolerade och det fanns sällsynt individuell cellnekros. Hepatocytkärnor innehöll också ofta stora basofila inklusionskroppar. Lungalveoler var fyllda med ödemvätska, en liten mängd fibrin, röda blodkroppar och alveolväggarna var multifokalt infiltrerade av makrofager. Sällan innehöll endotelceller i interalveolära kapillärer intranukleära inklusionskroppar. Endotelceller som innehöll dessa intranukleära inklusionskroppar sågs också vanligen i kärl i flera organ inklusive i njurar, benmärg, lymfkörtlar, lever och näthinna. Tecken på vaskulär skada och blödning var varierande närvarande. De huvudsakliga slutliga histologiska diagnoserna var meningoencefalit med vaskulit och misstänkt hepatisk nekros från en virusinfektion baserat på närvaron av intranukleära inklusionskroppar. De etiologiska differentialdiagnoserna var Canid Alphaherpesvirus 1 (CaHV-1), Canine Adenovirus typ 1 (CAdV) och hunddistempervirus (CDV) infektioner. Med tanke på att valpen var äldre än 3 veckor ansågs hundherpesvirusinfektion mindre sannolikt. Immunhistokemi för Adenovirus, CDV och Rabies utfördes på hjärnvävnad. Resultaten var positiva för Adenovirus och negativa för CDV och Rabies. CDV upptäcktes dock genom omvänd transkription PCR (IDEXX Laboratories) i ett prov av helblod som samlats in före avlivning. Immunhistokemisk färgning för både CAdV och CDV utfördes på hjärnvävnader vid PDS på en automatiserad färgningsplattform (Autostainer Plus, Dako Canada Inc., Mississauga, ON). Värmeinducerad epitopåtervinning utfördes och de primära antikropparna (get anti-CAdV, Virostat, Portland, ME och mus anti-CDV (klon DV2-12), Custom Monoclonals International, West Sacramento, CA) användes vid en utspädning av 1:4000. Ett avidin/biotin-blockerande reagens (Vector Labs; Burlingame, CA) applicerades före CAdV-antikroppen. Bindning av CAdV-antikroppen detekterades med användning av kanin anti-get immunglobuliner (Vector Labs; Burlingame, CA) och ett avidin-biotin immunperoxidase komplexreagens (Vector Labs; Burlingame, CA), och bindning av CDV-antikroppen detekterades med användning av ett HRP-märkt polymerdetektionsreagens (EnVision+ System - HRP Labelled Polymer, Dako Canada Inc., Mississauga, ON). Färgen visualiserades med användning av 3,3′-diaminobenzidintetrahydroklorid (DAB) (Dako Canada Inc., Mississauga, ON) som kromatogen. CDV-antigener detekterades inte. Ett stort antal celler med stark cytoplasmisk och nukleär färgning för CAdV-antigener observerades dock inom endotelcellerna, vilket bekräftar infektiös hundhepatit Ytterligare immunhistokemisk färgning utfördes också vid University of Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory för att utföra specifik färgning för att skilja mellan CAdV-1 och CAdV-2. Resultaten indikerade att få endotelceller hade positiv immunreaktivitet för CAdV-1. IHC-färgning för CAdV-2 var negativ. Efterföljande undersökning av kullarna visade att ingen av de 7 andra valparna utvecklade neurologiska tecken och valpen med andningssymtom återhämtade sig helt med antibiotika. Modern och valparna hölls för övervakning vid djurskyddsorganisationen i 2 månader innan de adopterades. Kontroll av alla valpar 5 månader senare visade att alla valpar mådde bra, utan några aktuella hälsoproblem.