En tidigare frisk 61-årig man besökte en lokal läkare med ett huvudproblem. Han hänvisades till neurokirurgiska avdelningen på vårt sjukhus på grund av misstankar om en tumör i huvudet. Magnetisk resonanstomografi av huvudet utfördes med en 3 T-enhet (GE DISCOVERY MR750; GE Healthcare) med gadoliniumbaserat kontrastmedel, och metastatisk tumör misstänktes. Blodundersökningen visade en hög prostataspecifik antigennivå på 165,42 ng/mL, och en datortomografisk skanning upptäckte lytiska lesioner i bäckenbenet intill den onormalt förstorade prostatan.. 99mTc-hydroxymetylerad difosfonat-benskintigrafi avslöjade flera benmetastaser i hela kroppen. Patienten hänvisades vidare till vår avdelning på grund av misstankar om flera benmetastaser från prostatacancer. En nålbiopsi av patientens prostata visade ett adenocarcinom med Gleason-poäng 5 + 4 = 9, vilket föranledde ADT. Förhöjning av nivån av prostataspecifikt antigen och postrenalt fel på grund av urinretention observerades 1 år efter att ADT hade påbörjats, och en kanal-transuretral resektion av prostata (TURP) utfördes därmed. Docetaxel administrerades för totalt sju kurer eftersom patientens tumör ansågs ha förvärvat kastrationsresistens. Men flera lymfnod- och benmetastaser förvärrades. Även om totalt sex kurer med cabazitaxel hade administrerats, avbröts det på grund av infektion av sacral trycksår och försämring av patientens allmänna tillstånd. Han behandlades därefter med abirateron, men han dog 2 år 6 månader efter att han hade diagnostiserats med prostatacancer med hjälp av prover som samlats in med TURP. RB1 och BRCA2-ko-deletion samt en trunkerande mutation av TP53 (G244Rfs*19) upptäcktes. Amplifiering av androgenreceptor (AR) -genen observerades med ett uppskattat koppsantal på 18,3. Dessutom upptäcktes en patched 1 (PTCH1) punktmutation (p.R441H) som en möjligen patogen förändring. Immunohistokemisk färgning utfördes med användning av standardprotokoll. Produkterna av antikropparna och de detaljerade protokollen visas i den kompletterande filen. Alla färgade sektioner skannades med användning av en digital bildskanner med hög upplösning (NanoZoomer-XR C12000; Hamamatsu Photonics, Hamamatsu, Shizuoka, Japan), som bestod av en trilineär sensorkamera, en detektor med 4096 pixlar × 64 linjer × 3 plattor och ett filter som endast delar sig i RGB med ett prisma. Den uppmätta upplösningen för alla mikroskopibilder var 0,23 μm/pixel, vilket motsvarade 40 × objektivlins. Hematoxylin- och eosin-färgning visade att tumörceller hade tydliga kärnor och en histologi som skilde sig från den hos typiska neuroendokrina prostatacancerceller utfördes för att bekräfta huruvida hedgehog-signalen förstärktes av en mutation av PTCH1 i vårt fall. GLI1-positiva tumörceller stod för mindre än 10 % av det totala antalet (Tilläggsfil: Fig. S1H) och cellernas färgbarhet i kärnan var inte starkare än för Leydig-celler som användes som positiv kontroll (data inte visad), vilket indikerar att hedgehog-signalen inte förstärktes.