17-летняя девочка была направлена в нашу эндокринологическую клинику с гиперкератозными и пигментированными поражениями на шее и всем туловище, которые появились, когда ей было 4 года. Ее рост был в пределах нормы в детстве (< 4 года), но постепенно начал быть ниже нормальной кривой роста, что в конечном итоге привело к низкорослости во взрослом возрасте. Пациентка была первым ребенком в семье не связанных между собой китайцев. Ее мать родила девочку после полного срока беременности. Вес девочки при рождении составил 4 кг, а рост — 50 см. У нее не было никаких неврологических дефектов или скелетных аномалий, диабета или связанных с ним симптомов, а также семейной истории рака. Родители пациентки, ее младшая сестра и брат не имели значительной медицинской истории (рис. ). При физическом осмотре у пациентки были обширные, бархатистые, толстые, гиперпигментированные бляшки на шее, спине и подмышках (рис. ). Пациентка была недисморфичной девочкой ростом 146 см (<-2SD). Лабораторные тесты не выявили никаких аномальных биохимических результатов (таблица). Уровни гормонов щитовидной железы, кортизола и андрогена находились в пределах нормы (уровень тестостерона, продемонстрированный в таблице, был ниже референсного диапазона, мы протестировали тестостерон еще раз, и другой показатель был нормальным: 31,8 нг/дл). Уровень глюкозы в крови натощак и уровень инсулина натощак составляли 88,2 мг/дл и 13,78 мкЕ/мл соответственно. Индекс оценки гомеостаза для резистентности к инсулину (HOMA-IR) в результате инсулина натощак (мЕ/мл) × глюкоза (ммоль/л) /22,5 был 3,0. Этот результат не указывал на резистентность к инсулину. Эти результаты исключили диагноз резистентности к инсулину, СД2, синдрома Кушинга и гиперандрогенизма. Рентгенологическое обследование (проведено в 14 лет) не выявило никаких отклонений (рисунок). Поскольку в нескольких случаях синдромального АН были выявлены генетические мутации, у пробандов и родителей был проведен мутационный анализ. Пробанды и ее родители подписали письменное информированное согласие. Были собраны пробы периферической крови (4 мл) пробанды и её родителей. Геномная ДНК была извлечена из крови с помощью QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen China Co., Ltd., Шанхай, Китай) в соответствии с рекомендациями производителя. Сначала мы провели секвенирование всего экзома для пробанды. Затем, основываясь на результатах тестирования секвенирования всего экзома, наличие мутации у пробанды и её родителей было подтверждено прямым секвенированием Сангер пораженного экзона. Все кодирующие экзоны были обогащены с помощью xGen Exome Research Panel v1.0 (Integrated DNA Technology, Inc). Захваченные библиотеки ДНК были секвенированы на Illumina Hiseq X Ten в соответствии с инструкциями производителя для парных 150-нмр-чтений. Варианты были рассмотрены как патогенные мутации, если они демонстрировали следующие компоненты: i) редкие или отсутствующие в вышеуказанных базах данных генома; ii) вариация, которая, как ожидается, будет иметь радикальное влияние на белок (мутация без смысла, смена рамки, мутация в месте сплайсинга или мутация без смысла, которая очень хорошо сохраняется среди видов); и iii) вариация, которая, как ожидается, будет вредной. Сэнгер-секвенирование пораженного экзона в FGFR3 было выполнено на образцах ДНК от пробонда и ее родителей. В соответствии с последовательностью ДНК гена FGFR3, праймеры экзона 14 FGFR3 были разработаны с помощью программного обеспечения Primer Premier 5. Функциональные эффекты вариантов белка были предсказаны с помощью PolyPhen2 (/), SIFT () и Mutation Taster (). С помощью анализа данных в сочетании с генетическими характеристиками и клиническими проявлениями мы выявили гетерозиготную мутацию c.1949A > C, p. Lys650Thr в FGFR3 у пробонда, которая считается патогенной мутацией. Поскольку родители пробонда не имели этой мутации, мутация, выявленная у пробонда, была де-нову-мутацией. Подтверждение секвенирования Сангера показано на рис. Мутация вызвала изменение белка от K до T в p. Lys650, который расположен в экзоне 14 FGFR3. Патогенность мутации на кости и коже была ранее зарегистрирована [–] и была подтверждена с помощью 3 различных программ (ожидаемые оценки мутации от каждой программы показаны в Дополнительном файле: Таблица S1): SIFT (0), PolyPhen-2 (1) и Mutation taster (вызывающая заболевание).