Pacientul era un băiat de 8 ani, care a prezentat o ptoză unilaterală progresivă treptat, la vârsta de 6 ani, care s-a dezvoltat în ptoză bilaterală la vârsta de 8 ani și 4 luni. Pacientul era un băiat de 8 ani cu ptoză bilaterală. La sfârșitul lunii decembrie 2017, pacientul a dezvoltat o febră de origine necunoscută, temperatura corpului său fiind de 38,5 °C. S-a recuperat după ce i s-au administrat antipiretice orale. La o săptămână după febră, pacientul a avut un accident vascular cerebral de diskinezie și a continuat să-și încline capul spre stânga (diskinezie cervicală), un fenomen care a fost însoțit de tulburări ale mișcărilor oculare. Pacientul a fost primul copil născut din părinți neconsangvini și nu există membri ai familiei afectați în mod similar. Deși a avut un „istoric de boli cardiace congenitale”, examenul ecografic color Doppler cardiac ulterior a relevat rezultate normale. Pacientul nu a avut întârzieri ale etapelor de dezvoltare. Examinarea fizică a relevat că avea pleoape superioare căzute bilateral (50% dintre pupile erau acoperite). În plus, avea abducție limitată la ochiul drept, distonie cervicală și forță musculară ușor redusă (grad 5-) la membrele inferioare bilaterale, în timp ce reflexele genunchiului bilateral au dispărut. Avea, de asemenea, criptorhidism drept și un penis mic. Nu putea să se aplece în față sau să sară pe un picior. Testele de sânge au arătat rezultate neobișnuite. În special, el a avut un nivel de anticorpi ai receptorului acetilcolinei de 0,82 nmol/L, în timp ce testele IgG pentru anticorpi anti-MuSK, anti-Titin și proteina 4 legată de receptorul lipoproteinelor cu densitate joasă au fost negative. Imagistica prin rezonanță magnetică a creierului a evidențiat semnale difuze în cortexul occipital, parietal și ganglionii bazali. Ptoza dreaptă a fost mai bună, deși nu a dispărut după tratamentul cu prednison, neostigmină și omeprazol din ianuarie 2018 până în octombrie 2019. Ptoza pleoapei a reapărut în martie 2020 și a progresat până la bilateralizare. În august 2019, a fost internat din cauza unei dureri de cap recurente și nu a răspuns la tratamentul cu manitol și carbamazepină. Pacientul era în prezent în clasa întâi de școală elementară cu note medii. Biblioteci întregi de exome au fost pregătite folosind xGen Exome Research Panel v1.0 (IDT, Iowa, Statele Unite) și secvențiate pe platforma Novaseq 6000 (Illumina, San Diego, CA, Statele Unite). Datele brute au fost curățate folosind pachetul software fastp. Ulterior, citirile de capăt pereche au fost efectuate folosind Burrows-Wheeler Aligner la genomul de referință Ensemble GRCh37/hg19. Chemarea sinonime și scurte indel au fost efectuate folosind pachetul software GATK urmat de adnotarea ANNOVAR. Predicția a fost efectuată folosind pachetele software Provean, Sift, Polypen2_hdiv, Polypen2_hvar, Mutationtaster, M-Cap și Revel. Patogenicitatea tuturor variantelor a fost interpretată în conformitate cu liniile directoare ale Colegiului American de Genetică și Genomică Medicală. Am efectuat secvențierea CNV[] în pacient, o metodă de detectare CNV bazată pe secvențierea de mare viteză. Pe scurt, ADN-ul genomic a fost mai întâi tăiat în fragmente de 200-300 pb prin sonicare, apoi a fost supus unui control de calitate prin electroforeză. Capetele fragmentelor de ADN au fost reparate folosind un sistem de enzime de reparare ADN pentru a genera capete netede, apoi un singur nucleot de adenină a fost adăugat la capătul 3' pentru a forma o coadă A proeminentă. Ulterior, genomul a fost amplificat prin PCR mediată de ligare pentru 4-6 cicluri. Am folosit aceeași platformă de secvențiere și protocoale de curățare a datelor pentru a detecta CNV cu o lungime de 100 kB și mai mare, folosind pachete software dezvoltate independent de Chigene. După aceea, am folosit Decipher, ClinVar, OMIM, DGV și ClinGen pentru adnotare. Cel puțin 2 ml de sânge periferic a fost colectat de la pacient și ADN-ul mitocondrial a fost extras folosind kitul de extracție a ADN-ului mitocondrial. ADN-ul mitocondrial a fost amplificat și purificat prin PCR, folosind ADN polimeraza de înaltă fidelitate și a fost vizualizat prin electroforeză în gel de agaroză. Secvențierea de 150 pb cu capete pereche a fost efectuată pe sistemul de secvențiere Novaseq6000. Datele secvențiate au fost aliniate la secvența de referință a NC_012920 (ADN circular de 16569 pb al genomului mitocondrial uman complet) folosind software-ul Burrows-Wheeler Aligner. Varianta a fost apoi mapată în baza de date MITOMAP, în timp ce patogenitatea a fost efectuată conform MITOtip. Rezultatele secvențierii întregului exom nu au evidențiat variante suspecte care să cauzeze boli. Apoi, am folosit metoda de analiză CNV (dezvoltată de Chigene) pe datele de secvențiere a întregului exom și am descoperit două deleții ale regiunii învecinate a cromozomului 16: 15.125.591-16326688 (aproximativ 1,20 Mb) și 9857005-14989502 (aproximativ 5,13 Mb). Datele de secvențiere CNV au evidențiat o deleție heterozigotă de novo a cromozomului 16: 9699585-16928372 (aproximativ 7,23 Mb). Apoi, am comparat această regiune și fenotipul sistemului nervos central cu pacienții Decipher documentați anterior. Genele legate de tulburările OMIM sunt enumerate în Tabel. Secvențierea ADN-ului mitocondrial a evidențiat rezultate negative.