Un bărbat de 61 de ani, sănătos, a fost examinat de către medicul local, cu o plângere principală de o masă pe capul său. A fost trimis la departamentul de neurochirurgie al spitalului nostru, cu suspiciunea de o tumoare în craniu. Imagistica prin rezonanță magnetică a capului a fost efectuată cu ajutorul unui dispozitiv de 3 T (GE DISCOVERY MR750; GE Healthcare) cu agent de contrast pe bază de gadoliniu, și s-a suspectat o tumoare metastatică. Examinarea sângelui a arătat un nivel ridicat de antigen specific prostatei de 165,42 ng/mL, iar o scanare cu tomografie computerizată a detectat leziuni litice ale osului pelvian adiacent la o prostată anormal de mărită.. Scintigrafia osoasă cu 99mTc-hidroximetilen difosfonat a relevat multiple metastaze osoase în tot corpul. Pacientul a fost trimis în continuare la departamentul nostru cu suspiciunea de metastaze osoase multiple de la cancerul de prostată. O biopsie cu ac a prostatei pacientului a evidențiat un adenocarcinom cu un scor Gleason de 5 + 4 = 9, care a determinat ADT. Creșterea nivelului antigenului specific prostatei și insuficiența postrenală datorată retenției urinare au fost observate la 1 an după începerea ADT, și astfel a fost efectuată o rezecție transuretrală a canalului prostatei (TURP). Docetaxel a fost administrat pentru un total de șapte cicluri, deoarece s-a considerat că tumora pacientului a dobândit rezistență la castrare. Cu toate acestea, metastazele multiple ale ganglionilor limfatici și ale oaselor au fost exacerbate. Deși un total de șase cicluri de cabazitaxel au fost deja administrate, acesta a fost întrerupt din cauza infecției ulcerului de presiune sacrală și a deteriorării stării generale a pacientului. Ulterior, a fost tratat cu abirateronă, dar a murit la 2 ani și 6 luni după ce a fost diagnosticat cu cancer de prostată utilizând probe colectate prin TURP. Co-delecția RB1 și BRCA2, precum și o mutație de trunchiere a TP53 (G244Rfs*19) au fost detectate. Amplificarea genei receptorului androgen (AR) a fost observată cu un număr estimat de copii de 18,3. În plus, o mutație punctuală patched 1 (PTCH1) (p.R441H) a fost detectată ca o posibilă modificare patogenă. Stainarea imunohistochimică a fost efectuată folosind protocoale standard. Produsele anticorpilor și protocoalele detaliate sunt prezentate în fișierul suplimentar. Toate secțiunile colorate au fost scanate folosind un scaner digital de diapozitive de înaltă rezoluție (NanoZoomer-XR C12000; Hamamatsu Photonics, Hamamatsu, Shizuoka, Japonia), care a constat dintr-o cameră cu senzor triliniar, un detector de 4096 pixeli × 64 linii × 3 plăci și un filtru care împarte doar în RGB cu ajutorul unui prismă. Rezoluția măsurată a tuturor imaginilor microscopice a fost de 0,23 μm/pixel, care a fost echivalentă cu 40 × obiectiv. Culoarea hematoxilină și eozină a arătat că celulele tumorale aveau nucleoli clari și o histologie diferită de cea a celulelor tipice de cancer neuroendocrin de prostată, pentru a confirma dacă semnalul hedgehog a fost amplificat de o mutație a PTCH1 în cazul nostru. Celulele tumorale GLI1-pozitive au reprezentat mai puțin de 10% din total (fișier suplimentar: Fig. S1H) și capacitatea de colorare nucleară a celulelor nu a fost mai puternică decât cea a celulelor Leydig utilizate ca control pozitiv (datele nu sunt prezentate), indicând că semnalul hedgehog nu a fost amplificat.