Um filhote de Husky de 5 semanas de idade, de sexo masculino, foi apresentado ao serviço de emergência do Centro Médico Veterinário (VMC) da Universidade de Saskatchewan com um histórico de um dia de comportamento neurológico anormal que incluiu circular, ataxia, vocalização e uma mente obtusa. Na apresentação, o filhote tinha uma mente obtusa, a ameaça estava ausente bilateralmente, a resposta pupilar à luz era normal, um reflexo de vômito estava presente e não foram observados outros déficits de nervos cranianos. O filhote estava circulando para a esquerda e tinha uma marcha ataxica. Não houve outros achados neurológicos significativos. A localização neuroanatômica sugeriu lesões do sistema nervoso central multifocal dentro do cérebro anterior e do tronco encefálico. A sociedade humana local recebeu a mãe e os seus 8 cachorros do norte de Saskatchewan; a mãe foi vacinada à chegada ao abrigo. Os cachorros foram subsequentemente vacinados sete dias depois com uma vacina viva modificada (Nobivac 1 DAPPC, Merck Animal Health) depois de todos os cachorros terem testado negativos para o parvovírus canino com um ensaio imuno-sorbente ligado a enzima (teste SNAP Parvo, IDEXX Laboratories, Markham, ON). Todos os outros cachorros e a mãe foram assintomáticos com exceção de um cachorro que apresentou ao VMC um dia antes do cachorro aqui referido com um histórico de 3 dias de letargia, aumento do esforço respiratório e descarga nasal serosa bilateral. Suspeitou-se de uma infeção do trato respiratório superior. Foi prescrita amoxicilina (Apotex Inc.; Toronto; ON) 22 mg/kg PO q12 durante 10 dias e o cachorro foi dispensado com instruções para ser imediatamente desmontado da mãe e isolado dos outros cachorros. Não foram observadas anormalidades neurológicas neste ou em qualquer um dos outros cachorros em qualquer ponto temporal. Este cachorro foi colocado em isolamento à chegada, devido a uma suspeita de uma doença infeciosa subjacente, incluindo possível cinomose canina. Foi obtido consentimento da sociedade humanitária local para realizar diagnósticos e fornecer cuidados de apoio. Foram administrados fluidos Normosol R (Hospira, Montreal, QC) por via intravenosa a 4 ml/kg/hora. Foi também fornecida analgesia com hidromorfona (Sandoz Inc., Boucherville, QC) 0.05 mg/kg IV q4. Um painel de emergência revelou um volume de células sanguíneas de 22% (26.5–35.5), proteína total de 5.8 g/dl (3.7–4.8), Azottick® (Siemens Healthcare Diagnostics Inc., Tarrytown, NY) nitrogénio ureico no sangue de 5-15 mg/dl (13.1–46.2) e glucose no sangue de 10.3 mmol/l (6.7–8.9). Foi também submetido um hemograma completo à Prairie Diagnostic Services Inc. (PDS), que revelou uma anemia regenerativa moderada; contagem de glóbulos vermelhos (RBC) 3.25 × 1012/L (5.8–8.5) e hematócrito (HCT) 0.22 L/L (0.39–0.56). Foi também notado um desvio à esquerda moderado com alterações tóxicas indicativas de inflamação aguda; contagem de glóbulos brancos (WBC) 10.7 × 109/L (4.9–15.4), neutrófilos segmentados 8.0 × 109/L (3.0–10.0) e bandas 1.0 × 109/L (0.0–0.1). Os resultados do hemograma incluíram intervalos de referência específicos para a idade relevantes para este paciente []. Os diagnósticos diferenciais iniciais para os sinais neurológicos incluíam cinomose canina, meningite bacteriana, meningite protozoária (por exemplo, toxoplasmose) e, com menor probabilidade, uma possível manifestação incomum de raiva. O tratamento sintomático com antibióticos de amplo espectro foi iniciado e incluiu Metronidazol (Baxter, Mississauga, ON) 25 mg/kg IV q12, Piperacillin (SteriMax Inc., Oakville, ON) 40 mg/kg IV lentamente ao longo de 30 min q6, e a intenção de administrar Clindamycin (Intervet, Kirkland, QC) 12.5 mg/kg PO q12. A Clindamycin não pôde ser administrada, pois o cachorro rapidamente perdeu o reflexo de vômito, à medida que a sua mente se deteriorava progressivamente nas primeiras 4 h após a apresentação. O cachorro estava perdendo e recuperando a consciência a cada minuto e tornou-se não responsivo a estímulos externos. Após discussão adicional com a sociedade humanitária local, foi decidido, por razões de bem-estar e um suposto mau prognóstico, eutanasiar o cachorro. O cachorro foi eutanasiado com Pentobarbital intravenoso (Bimeda-MTC, Cambridge, ON) 2 ml/4.5 kg; a morte foi confirmada por auscultação cardíaca. Não foi necessário agente anestésico adicional devido à mente obtusa do cachorro. O cachorro foi eutanasiado 18 h após os primeiros sinais clínicos terem sido notados. Uma necropsia foi realizada no Prairie Diagnostic Services (PDS), em Saskatoon, Saskatchewan, no dia seguinte. O cachorro estava em boa condição física. Os achados brutos significativos foram pulmões edematosos, cor-de-rosa a vermelho pálido, e um fígado castanho pálido, difusamente aumentado. Não foi observado edema da vesícula biliar. A histopatologia foi realizada em órgãos principais incluindo o cérebro (cerebrum, tálamo, cerebelo, ponte, medula), pulmões, coração, fígado, baço, olhos, medula óssea, rins, gânglios linfáticos e intestinos delgados. Áreas de hiper-celularidade no cérebro centradas em vasos e acompanhadas por hemorragia aguda foram observadas particularmente na coroa radiada, núcleo caudado, tálamo, ponte e leptomeninges. Os vasos foram rodeados e infiltrados por macrófagos e isto foi associado a edema, pequena quantidade de fibrina, células inflamatórias necróticas e hemorragia no espaço de Virchow-Robbin e no neuropilo adjacente. Alguns macrófagos apresentaram eritrofagia. As células endoteliais foram hipertrofiadas e muitas vezes continham uma grande inclusão intranuclear basófila. Os hepatócitos foram difusamente, levemente vacuolados e houve uma rara necrose de células individuais. Os núcleos dos hepatócitos também frequentemente continham grandes inclusões basófilas. Os alvéolos pulmonares foram preenchidos com fluido edematoso, uma pequena quantidade de fibrina, glóbulos vermelhos e as paredes alveolares foram infiltradas de forma multifocal por macrófagos. Raramente as células endoteliais dos capilares interalveolares continham inclusões intranucleares. As células endoteliais que continham estas inclusões intranucleares foram também comumente observadas em vasos de múltiplos órgãos incluindo os rins, medula óssea, gânglios linfáticos, fígado e retina. Os sinais de lesão vascular e hemorragia estavam presentes de forma variável. Os principais diagnósticos histológicos finais foram meningoencefalite com vasculite e necrose hepática suspeita de ser de uma infecção viral com base na presença das inclusões intranucleares. Os diagnósticos diferenciais etiológicos foram Canid Alphaherpesvirus 1 (CaHV-1), Canine Adenovirus type 1 (CAdV) e distemper canino (CDV). Dado que o cachorro tinha mais de 3 semanas de idade, a infecção por herpesvírus canino foi considerada menos provável. Immunohistoquímica para Adenovírus, CDV e Raiva foram realizados em tecido cerebral. Os resultados foram positivos para Adenovírus, e negativos para CDV e Raiva. CDV foi, no entanto, detectado por PCR de transcrição reversa (IDEXX Laboratories) numa amostra de sangue total recolhido antes da eutanásia. A coloração imuno-histoquímica para ambos os CAdV e CDV foi realizada em tecidos cerebrais no PDS numa plataforma de coloração automatizada (Autostainer Plus, Dako Canada Inc., Mississauga, ON). A recuperação do epítopo induzida pelo calor foi realizada e os anticorpos primários (anti-CAdV de cabra, Virostat, Portland, ME e anti-CDV de rato (clone DV2-12), Custom Monoclonals International, West Sacramento, CA) foram usados numa diluição de 1:4000. Um reagente de bloqueio de avidina/biotina (Vector Labs; Burlingame, CA) foi aplicado antes do anticorpo anti-CAdV. A ligação do anticorpo anti-CAdV foi detetada usando imunoglobulinas anti-cabra de cabra (Vector Labs; Burlingame, CA) e um reagente de complexo de imunoperoxidase de avidina-biotina (Vector Labs; Burlingame, CA), e a ligação do anticorpo anti-CDV foi detetada usando um reagente de deteção de polímero marcado com HRP (EnVision+ System - HRP Labelled Polymer, Dako Canada Inc., Mississauga, ON). A coloração foi visualizada usando 3,3'-diaminobenzidina tetracloridrato (DAB) (Dako Canada Inc., Mississauga, ON) como cromógeno. Os antigénios CDV não foram detetados. No entanto, foram observadas numerosas células com forte coloração citoplasmática e nuclear para antigénios CAdV dentro das células endoteliais, confirmando a hepatite canina infecciosa A coloração imuno-histoquímica foi também realizada no Laboratório de Diagnóstico Veterinário da Universidade de Minnesota para realizar uma coloração específica para diferenciar entre CAdV-1 e CAdV-2. Os resultados indicaram que poucas células endoteliais tinham uma imunorreatividade positiva para CAdV-1. A coloração imuno-histoquímica para CAdV-2 foi negativa. O acompanhamento da ninhada revelou que nenhum dos outros 7 cachorros desenvolveu sinais neurológicos e o cachorro com sinais respiratórios fez uma recuperação completa com antibióticos. A mãe e os cachorros foram mantidos para vigilância na sociedade humana durante 2 meses antes de serem adotados. O reexame de todos os cachorros 5 meses depois revelou que todos os cachorros estavam bem, sem preocupações de saúde atuais.