O paciente era um menino de 8 anos, que apresentou ptose unilateral gradualmente progressiva aos 6 anos, que se desenvolveu para ptose bilateral aos 8 anos e 4 meses. O paciente era um menino de 8 anos com ptose bilateral. No final de Dezembro de 2017, o paciente desenvolveu uma febre de origem desconhecida, com a temperatura do corpo a atingir os 38.5 °C. Recuperou após receber antipiréticos orais. Uma semana após a febre, o paciente teve um ataque de discinesia e continuou a inclinar a cabeça para a esquerda (discinesia cervical), um fenómeno que foi acompanhado por distúrbios do movimento ocular. O paciente foi o primeiro filho nascido de pais não consanguíneos, e não há membros da família com problemas semelhantes. Embora ele tivesse um "histórico de doença cardíaca congênita", o subsequente exame de ultrassom color Doppler cardíaco revelou resultados normais. O paciente não teve atrasos nos marcos de desenvolvimento. O exame físico revelou que ele tinha queda bilateral da pálpebra superior (50% das pupilas cobertas). Além disso, ele tinha abdução limitada no olho direito, distonia cervical e força muscular ligeiramente reduzida (grau 5-) nos membros inferiores, enquanto os reflexos dos joelhos desapareceram. Ele também apresentava criptorquidismo direito e um pênis pequeno. Ele não podia nem agachar nem pular em um pé. Os testes de sangue mostraram resultados sem relevância. Notavelmente, ele tinha um nível de anticorpo do receptor de acetilcolina no sangue de 0.82 nmol/L, enquanto os testes de IgG para anticorpo anti-MuSK, anti-Titin e proteína 4 relacionada ao receptor de lipoproteína de baixa densidade humana foram negativos. A ressonância magnética do cérebro revelou sinais difusos no occipital, córtex parietal e gânglios basais. A sua ptose direita estava melhor, embora não tenha desaparecido após o tratamento com prednisona, neostigmina e omeprazol de janeiro de 2018 a outubro de 2019. A queda da pálpebra do olho reapareceu em março de 2020 e progrediu para ser bilateral. Em agosto de 2019, foi hospitalizado devido a uma dor de cabeça recorrente e não reagiu ao manitol e à carbamazepina. O paciente estava atualmente na primeira classe da escola primária com notas médias. Bibliotecas de exoma completo foram preparadas utilizando o xGen Exome Research Panel v1.0 (IDT, Iowa, Estados Unidos) e sequenciadas na plataforma Novaseq 6000 (Illumina, San Diego, CA, Estados Unidos). Os dados brutos foram limpos utilizando o pacote de software fastp. Subsequentemente, as leituras de extremidade emparelhada foram realizadas utilizando o Burrows-Wheeler Aligner para o genoma de referência Ensemble GRCh37/hg19. A chamada de indel sinônimo e curto foi realizada utilizando o pacote de software GATK seguido pela anotação ANNOVAR. A previsão foi realizada utilizando os pacotes de software Provean, Sift, Polypen2_hdiv, Polypen2_hvar, Mutationtaster, M-Cap e Revel. A patogenicidade de todas as variantes foi interpretada de acordo com as diretrizes do American College of Medical Genetics and Genomics. Realizamos a sequenciação de CNV[], um método de deteção de CNV baseado na sequenciação de alto rendimento, no paciente. Resumidamente, o ADN genómico foi primeiro cortado em fragmentos de 200-300 pb através de sonicação, depois sujeito a controlo de qualidade através de eletroforese. As extremidades dos fragmentos de ADN foram reparadas utilizando um sistema de enzimas de reparação de ADN para gerar extremidades sem arestas, depois foi adicionado um único nucleótido de adenina à extremidade 3' para formar uma cauda de A saliente. Posteriormente, o genoma foi amplificado através de PCR mediada por ligação durante 4-6 ciclos. Usámos a mesma plataforma de sequenciação e protocolos de limpeza de dados para detetar CNV com uma extensão de 100 kB e superior, utilizando pacotes de software desenvolvidos de forma independente pela Chigene. Depois disso, empregámos o Decipher, o ClinVar, o OMIM, o DGV e o ClinGen para anotação. Foi coletado pelo menos 2 ml de sangue periférico do paciente e o DNA mitocondrial foi extraído utilizando o kit de extração de DNA mitocondrial. O DNA mitocondrial completo foi amplificado e purificado por PCR, utilizando a DNA polimerase de alta fidelidade e visualizado por eletroforese em gel de agarose. A sequenciamento de 150 pb foi realizado no sistema de sequenciamento Novaseq6000. Os dados sequenciados foram alinhados com a sequência de referência de NC_012920 (DNA circular de 16569 pb do genoma mitocondrial humano completo) utilizando o software Burrows-Wheeler Aligner. As variantes foram então mapeadas na base de dados MITOMAP, enquanto a patogenicidade foi realizada de acordo com o MITOtip. Os resultados do sequenciamento do exoma completo não revelaram variantes suspeitas de causar doenças. Em seguida, empregamos o método de análise CNV (desenvolvido por Chigene) em dados de sequenciamento do exoma completo e descobrimos que duas deleções da região vizinha de Chr16:15,125,591-16326688 (aproximadamente 1,20 Mb) e 9857005-14989502 (aproximadamente 5,13 Mb). Os dados de sequenciamento CNV revelaram deleção heterozigótica de novo de chr16:9699585-16928372 (aproximadamente 7,23 Mb). Em seguida, comparamos essa região e o fenótipo do sistema nervoso central com pacientes do Decipher previamente documentados. Os genes relacionados a distúrbios OMIM estão listados na Tabela. O sequenciamento do DNA mitocondrial revelou resultados negativos.