De proefpersoon was een 5-jarige Chinese jongen die 1,5 jaar lang met een hoofdklacht van taalarticulatiestoornissen, ongecoördineerde bewegingen gedurende een half jaar en herhaalde aanvallen gedurende een week in het ziekenhuis werd opgenomen. Een stotter werd anderhalf jaar geleden zonder duidelijke oorzaken opgemerkt en hij had geleidelijk onduidelijke uitspraak, onhandige spraak en trage reactie ontwikkeld. In de afgelopen 6 maanden begon hij ongecoördineerde bewegingen te hebben, zoals ataxie en onstabiele loop. Drie episodes van gegeneraliseerde tonisch-clonische aanvallen hadden plaatsgevonden in de week voorafgaand aan het bezoek aan de kliniek; elke aanval duurde ongeveer 1 min en vond ongeveer eens in de 2 dagen plaats. Hij bereikte de juiste mijlpalen in de ontwikkeling voor de leeftijd van 3,5 jaar en werd op tijd geboren door vaginale bevalling zonder complicaties. Er was geen blootstelling aan alcohol of medicijnen tijdens de zwangerschap en de Apgar-scores waren 10 en 10 op 1 en 5 min, respectievelijk. Zijn ouders hadden geen bekende bloedverwantschap en zowel zij als een oudere zus waren gezond. Bij lichamelijk onderzoek waren lengte, gewicht en hoofdomtrek normaal voor de leeftijd, en hij was bij bewustzijn en vertoonde normale spierkracht en spiertonus. De patellaire reflex en de Achillespeesreflex waren normaal, en Babinski-signalen waren negatief. Hij was niet in staat om de hand-wissel-bewegingstest, hiel-knie-tibia-test of vinger-neus-test uit te voeren vanwege slechte samenwerking met de instructies. De intelligentiequotiëntwaarde, gemeten door de gecombineerde Raven-test, was 80 (een gemiddeld niveau). De tests voor melkzuur in het bloed, homocysteïne, ammoniak, ceruloplasmine en lever- en nierfunctie waren normaal. Tests voor antilichamen voor auto-immuun encefalitis in cerebrospinale vloeistof en bloed waren negatief. De screening voor genetische metabolische ziekten in bloed en urine vertoonde geen duidelijke afwijkingen. Een elektro-encefalogram (EEG) vertoonde meerdere pieken en langzame golfontladingen bilateraal. Een MRI-scan van de hersenen vertoonde hoge hyperintensiteiten naast de bilaterale achterste hoorns van de laterale ventrikels op T2-gewogen beelden en verbrede cerebellaire fissuren. De NextSeq500-sequentiebepaler (Illumina Inc., VS) werd gebruikt om de exons in de genen die verband houden met erfelijke leukoencephalopathieën te screenen. De genen in het panel zijn vermeld in de aanvullende bestand. De verkregen gegevens werden geanalyseerd met behulp van bijhorende software en de varianten werden genoemd volgens het protocol. De varianten werden geïnterpreteerd volgens de richtlijnen van het American College of Medical Genetics and Genomics en het fenotype van de patiënt. Directe sequentiebepaling valideerde de gemiste missense-mutaties. Directe sequentiebepaling werd uitgevoerd op DNA van de proefpersoon en zijn ouders met behulp van de ABI3500-sequentiebepaler (Life Technology, VS) en de monsters werden onderworpen aan sequentieanalyse met behulp van Sequence Scanner v1.0 (Applied Biosystems, VS). De Chinese controles werden verkregen van het Shenyang Kingmed for Clinical Laboratory (Shenyang, China). De sequentiebepalingsprocedure en de validatie van de mutatie werden uitgevoerd door het Shenyang Kingmed for Clinical Laboratory (Shenyang, China), dat diensten van derden aanbiedt. De mogelijke effecten van de mutaties op eiwitfunctie werden geanalyseerd met behulp van het voorspellingshulpmiddel Polymorphism Phenotyping v2 (PolyPhen-2) (), SIFT () en MutationTaster (). De genetische analyse toonde aan dat de proefpersoon een homozygote missense puntmutatie c.892G > A(p.Glu298Lys) (referentiesequentie: NM_017882.2) in exon 7 in CLN6 had en dat beide ouders heterozygoot waren voor de mutatie voorgeschreven. VPA werd toegediend in een dosis van 15 mg/kg per dag, verdeeld over twee doses, die binnen 2 weken werd verhoogd tot ongeveer 25 mg/kg per dag. De bloedconcentratie lag gedurende 6 maanden tussen 56 en 78 μg/ml. Bij de follow-up na 6 maanden waren de aanvallen afgenomen tot ongeveer eenmaal per maand, spraakstoornissen en ongecoördineerde bewegingen bleven bestaan en er werd geen verlies van gezichtsvermogen vastgesteld. Op de locatie van CLN6 werden 31 missense mutaties geanalyseerd, waaronder de gemelde en onze mutaties; 22,6% (7/31) bevond zich in de cytoplasmatische domeinen, 32,2% (10/31) in de TM-domeinen en 45,2% (14/31) in de luminale domeinen van het eiwit. Wat elke domeinen van het eiwit betreft, bevonden de mutaties zich voornamelijk in de TM3-TM4-lus (6/31), TM1-TM2-lus (4/31) en C-terminus (4/31), en er werden geen mutaties gerapporteerd in de TM4-TM5-lus, TM5-TM6-lus en TM7-domein (tabel).