Een voorheen gezonde 61-jarige man bezocht een plaatselijke dokter met een klacht over een massa op zijn hoofd. Hij werd verwezen naar de neurochirurgie van ons ziekenhuis op verdenking van een tumor in de schedel. Magnetische resonantie van het hoofd werd uitgevoerd met een 3 T apparaat (GE DISCOVERY MR750; GE Healthcare) met een op gadolinium gebaseerd contrastmiddel, en er werd een vermoedelijke metastatische tumor gevonden. Bloedonderzoek toonde een hoog prostaatspecifiek antigeen niveau van 165.42 ng/mL, en een computertomografie scan detecteerde lytische laesies van het bekkenbot naast de abnormaal vergrote prostaat.. 99mTc-Hydroxymethylen diphosphonate bot scintigraphie onthulde meerdere botmetastasen door het hele lichaam. De patiënt werd verder verwezen naar onze afdeling op verdenking van meerdere botmetastasen van prostaatkanker. Een naaldbiopsie van de prostaat van de patiënt onthulde een adenocarcinoom met een Gleason-score van 5 + 4 = 9, wat ADT vereiste. Verhoogde niveaus van prostaatspecifiek antigeen en postrenale insufficiëntie als gevolg van urineretentie werden 1 jaar na aanvang van ADT waargenomen en een kanaal-transuretrale resectie van de prostaat (TURP) werd dus uitgevoerd. Docetaxel werd toegediend voor een totaal van zeven kuren omdat de tumor van de patiënt werd beschouwd als resistent tegen castratie. Echter, meerdere lymfeklieren en botmetastasen werden verergerd. Hoewel een totaal van zes kuren cabazitaxel al was toegediend, werd het stopgezet vanwege sacrale druk ulcer infectie en verslechtering van de algemene toestand van de patiënt. Hij werd vervolgens behandeld met abirateron, maar hij stierf 2 jaar 6 maanden nadat hij gediagnosticeerd werd met prostaatkanker met behulp van specimens die werden verzameld door TURP. RB1 en BRCA2 co-deletie werden gedetecteerd evenals een verkorting van de TP53-mutatie (G244Rfs*19). Amplificatie van het androgeenreceptor (AR) gen werd waargenomen met een geschat kopieergetal van 18.3. Daarnaast werd een patched 1 (PTCH1) puntmutatie (p.R441H) gedetecteerd als een mogelijk pathogene verandering. Immunohistochemische kleuring werd uitgevoerd volgens standaardprotocollen. De producten van de antilichamen en de gedetailleerde protocollen worden getoond in de aanvullende bestand. Alle gekleurde secties werden gescand met behulp van een digitale dia-scanner met hoge resolutie (NanoZoomer-XR C12000; Hamamatsu Photonics, Hamamatsu, Shizuoka, Japan), die bestond uit een trilineaire sensorkamera, een detector van 4096 pixels × 64 lijnen × 3platen, en een filter die alleen verdeelt in RGB met een prisma. De gemeten resolutie van alle microscopiebeelden was 0,23 μm/pixel, wat gelijkwaardig was aan 40 × objectief. Hematoxyline- en eosinekleuring toonde aan dat tumorcellen duidelijke nucleoli hadden en een histologie die verschilde van die van typische neuro-endocriene prostaatkankercellen werd uitgevoerd om te bevestigen of het hedgehog signaal werd versterkt door een mutatie van PTCH1 in ons geval. GLI1-positieve tumorcellen waren goed voor minder dan 10% van het totaal (Additionele bestand: Fig. S1H) en de nucleaire kleuring van de cellen was niet sterker dan die van Leydig cellen gebruikt als positieve controle (gegevens niet getoond), wat aangeeft dat het hedgehog signaal niet werd versterkt.