En levertumor ble oppdaget hos en 72 år gammel mannlig pasient med levercirrhose Child-Pugh Stage A, en historie med type 2 diabetes og kronisk hepatitt C virusinfeksjon (HCV, genotype 1B), som ble diagnostisert for 13 år siden. Leverenzymer var litt forhøyet med alanin aminotransferase 89 U/L (referanse: 10-50 U/L) og aspartat aminotransferase 65 U/L (referanse: <50 U/L). Den 4 cm store tumoren ble oppdaget ved rutinemessig sonografi og fjernet ved laparoskopisk leversegment reseksjon. Morfologisk analyse, immunhistokjemi og multiregionale, neste generasjons sekvensering (NGS) ble brukt på representative tumorseksjoner som beskrevet. Tabell og figur illustrerer histopatologiske og molekylære funn i 14 individuelle tumorområder, som ble gruppert i tre tumorregioner (A, B og C) i henhold til deres dominerende morfologiske og molekylære egenskaper. I oppsummering ble en multinodulær, kombinert hepatocellulær/cholangiocellulær karsinom, tumorstadium T1 grad 2-3, diagnostisert. Intratumoral heterogen ekspresjon av fem levercelle markører (CK7, CK19, glutamin syntetase, p53, β-catenin) ble oppdaget inkludert en dobbel positivitet for glutamin syntetase, nukleær β-catenin og p53 i tumorregion A. Neste generasjons sekvensering ble utført med en minimumsdekning på 1329 (SD ± 725) lesninger per amplifikon av hvert enkelt tumorområde. Sekvenseringsresultatene ga en p.D32V (c.363 A > T) mutasjon og en TP53 ivs8-1 (c.783-1 G > A) spleisestedmutasjon i tumorområde A. Ved å sammenligne muterte allelfrekvenser, viste CTNNB1- og TP53-genkopier et lignende spekter av begge frekvenser i område A1-3. Alle muterte og villtype tumorområder viste i tillegg en SNP i ekson 7 (rs17880604). Samlet viste morfologiske og immunohistokjemiske funn sammen med sekvenseringsresultater at en tumorsubklon med hepatocellulær differensiering hadde samtidige CTNNB1- og TP53-genmutasjoner. Til dags dato, etter en oppfølgingsperiode på 12 måneder, hadde pasienten en lokal gjentakelse av en levertumor som var uopererbar og ble derfor behandlet med transarterial chemoembolization (TACE).