Pasienten var en 8 år gammel gutt som hadde gradvis progressiv unilateral ptosis i en alder av 6 år, som utviklet seg til bilateral ptosis i en alder av 8 år og 4 måneder. Pasienten var en 8 år gammel gutt med bilateral ptosis. På slutten av desember 2017 utviklet pasienten en feber av ukjent opprinnelse, med en kroppstemperatur så høy som 38,5 °C. Han ble frisk igjen etter å ha fått orale antipyretika. En uke etter feberen hadde pasienten et anfall av dyskinesia og fortsatte å vippe hodet mot venstre (cervical dyskinesia), et fenomen som ble ledsaget av øye bevegelsesforstyrrelser. Pasienten var det første barnet født av foreldre som ikke var i slekt, og det er ingen andre familiemedlemmer som er berørt på samme måte. Selv om han hadde en "historie med medfødt hjertesykdom", viste senere ultralydundersøkelser av hjertet med fargespekter-doppler normale resultater. Pasienten hadde ingen forsinkelser i utviklingsmessige milepæler. Ved fysisk undersøkelse ble det avdekket at han hadde dobbeltsidig øvre øyelokkfall (50 % pupiller dekket). Videre hadde han begrenset abduksjon i høyre øye, nakkedystoni og litt redusert (grad 5-) muskelstyrke i bilaterale underekstremiteter, mens hans bilaterale kne-reflekser forsvant. Han hadde også høyre kryptorkisme og en liten penis. Han kunne verken sitte på huk eller hoppe på én fot. Blodprøver viste bemerkelsesverdige resultater. Spesielt hadde han et nivå av acetylkolinreseptor antistoff i blodet på 0,82 nmol/L, mens IgG-tester for anti-MuSK, anti-Titin antistoff, og humant lavdensitets lipoprotein reseptor-relatert protein 4 var negative. Brain magnetisk resonansavbildning avslørte diffuse signaler i occipital, parietal cortex og basal ganglia. Hans høyre ptosis ble bedre, selv om den ikke forsvant etter behandling med prednison, neostigmin og omeprazol fra januar 2018 til oktober 2019. Hans øyelokk falt ned igjen i mars 2020 og ble bilateral. I august 2019 ble han innlagt på sykehus på grunn av en tilbakevendende hodepine og reagerte ikke på mannitol og carbamazepin. Pasienten var for tiden i første klasse på grunnskole med middels karakterer. Hele exom-biblioteker ble forberedt ved hjelp av xGen Exome Research Panel v1.0 (IDT, Iowa, USA) og sekvensert på Novaseq 6000-plattformen (Illumina, San Diego, CA, USA). Rådata ble renset ved hjelp av fastp-programvarepakken. Deretter ble de parrede endene lest ved hjelp av Burrows-Wheeler Aligner til Ensemble GRCh37/hg19-referansegener. Synonym og kort indel-anrop ble utført ved hjelp av GATK-programvarepakken etterfulgt av ANNOVAR-annotation. Prediksjon ble utført ved hjelp av Provean, Sift, Polypen2_hdiv, Polypen2_hvar, Mutationtaster, M-Cap og Revel-programvarepakkene. Patogeniteten til alle variantene ble tolket i henhold til retningslinjene fra American College of Medical Genetics and Genomics. Vi utførte CNV-sekvensering[], en CNV-deteksjonsmetode basert på høy gjennomstrømningssekvensering, hos pasienten. Kort fortalt ble genomisk DNA først kuttet til 200-300 bp fragmenter via sonikering, deretter ble det underkastet kvalitetskontroll via elektroforese. Endes av DNA-fragmenter ble reparert ved hjelp av et DNA-reparasjonsenzymsystem for å generere stumpe ender, deretter ble et enkelt adeninnukleotid tilsatt til 3'-enden for å danne en A-hale. Deretter ble genomet amplifisert ved hjelp av ligeringsmediert PCR i 4-6 sykluser. Vi brukte den samme sekvenseringsplattformen og data-rengjøringsprotokoller for å oppdage CNV-er med en lengde på 100 kB og over ved hjelp av Chigene uavhengig utviklede programvarepakker. Deretter brukte vi Decipher, ClinVar, OMIM, DGV og ClinGen for annotering. Minst 2 ml perifert blod ble samlet fra pasienten, og mitokondrielt DNA ble ekstrahert ved hjelp av mitokondrielt DNA-ekstraksjonssett. Full lengde mitokondrielt DNA ble amplifisert og renset via PCR, ved hjelp av høyfølsom DNA-polymerase og visualisert via agarosegelelektroforese. Sekvensering av 150 bp ble utført på Novaseq6000 sekvenseringssystemet. De sekvenserte dataene ble justert til referansesekvensen av NC_012920 (komplett humant mitokondrielt genom 16569 bp sirkulær DNA) ved hjelp av Burrows-Wheeler Aligner-programvaren. Variantene ble deretter kartlagt på MITOMAP-databasen, mens patogenisitet ble utført i henhold til MITOtip. Sekvenseringsresultat fra hele exomet avslørte ingen mistenkte sykdomsfremkallende varianter. Deretter brukte vi CNV-analysemetoden (utviklet av Chigene) på hele exom-sekvenseringsdata og fant at to slettinger i naboregionen av Chr16:15,125,591-16326688 (ca. 1,20 Mb) og 9857005-14989502 (ca. 5,13 Mb) ble oppdaget. CNV-sekvenseringsdata avslørte de novo heterozygot sletting av chr16:9699585-16928372 (ca. 7,23 Mb). Deretter sammenlignet vi denne regionen og sentralnervesystemfenotypen med tidligere dokumenterte Decipher-pasienter. Genene relatert til OMIM-lidelser er oppført i tabell. Den mitokondrielle DNA-sekvenseringen avslørte negative resultater.