Un maschio di tre anni di età, castrato, di razza huacaya alpaca, del peso di 81 kg, è stato presentato alla fine di novembre 2019 all'UCD Veterinary Hospital insieme a un'altra alpaca sana. L'alpaca aveva una storia di due giorni di segni di coliche (rotolamento e vocalizzazione), tenesmo e scarso passaggio di feci. Era stato visitato dal veterinario di riferimento, che lo aveva trattato con albendazolo e desametasone e gli aveva fatto iniziare un ciclo di amoxicillina potenziata, ma non aveva risposto a questo trattamento. Prima di allora, aveva ricevuto un trattamento antiparassitario sotto forma di albendazolo all'inizio di settembre. Riceveva vaccinazioni annuali contro la clostridiosi. Era tenuto all'aperto con una seconda alpaca e pascolava accanto alle pecore. All'esame clinico iniziale, l'alpaca era tranquillo, vigile e reattivo. La sua condizione fisica era da moderata a buona. La sua frequenza respiratoria era aumentata a 36 respiri al minuto (range normale: 10-30), probabilmente a causa dello stress del viaggio e della restrizione, ma la sua frequenza cardiaca (88 battiti al minuto, range normale: 60-90 battiti al minuto) e la temperatura (38,2 °C, range normale: 37,5-38,9 °C) erano entro i limiti normali. [] Le membrane mucose avevano un colore rosa pallido. Le contrazioni del primo compartimento (C1) erano ridotte in frequenza a una ogni due minuti. L'alpaca non tollerava la palpazione addominale, in particolare nella regione cranioventrale, che manifestava con un forte suono di grugnito e con i tentativi di fuga dalla restrizione. Non sono state identificate altre anomalie. Nel corso delle successive 24 ore di ospedalizzazione, tuttavia, l'alpaca ha mostrato una prolungata posizione supina, spesso in una posizione semi-laterale con le zampe parzialmente estese anziché rannicchiato con tutte e quattro le zampe sotto di lui. Si riteneva che ciò fosse indicativo di dolore addominale. Ha anche mostrato episodi intermittenti di tenesmo e ha prodotto un numero minimo di feci di colore e consistenza normali. Ha consumato solo una piccolissima quantità di fieno e non è stato osservato mangiare il mangime concentrato offerto. Il sangue per l'ematologia (Advia 2102, Siemens, Dublino, Irlanda) e la biochimica plasmatica (Atellica CH 930, Siemens, Dublino, Irlanda) è stato raccolto tramite venipuntura giugulare il giorno del ricovero in ospedale e il quinto e settimo giorno di ospedalizzazione. Non erano disponibili intervalli di riferimento (RI) per alpaca specifici per il laboratorio di patologia clinica UCD, quindi sono stati utilizzati gli intervalli di riferimento descritti da Cockcroft et al. [] e Dawson et al. [] per interpretare i risultati. L'analisi ematologica (Tabella) indicava un'anemia moderata, macrocitica, ipocromica con moderata reticolocitosi. Questa anemia rigenerativa non poteva essere attribuita alla concomitante, moderata ipofosfatemia riscontrata con l'analisi biochimica (Tabella), che non era sufficientemente grave da causare emolisi. Né poteva essere attribuita a un'infezione da micoplasma, che non poteva essere identificata sui campioni di sangue. Infiammazione marcata è stata indicata da leucocitosi marcata dovuta a neutrofilia marcata, monocitosi moderata ed eosinofilia lieve, insieme a trombocitosi moderata e reattiva. Ciò è stato confermato dal pannello biochimico che ha evidenziato iperproteinaemia marcata dovuta a iperglobulinemia marcata e ipoalbuminemia lieve. La linfopenia lieve e l'iperglicemia moderata possono essere attribuibili allo stress. C'era una lieve azotemia con un lieve aumento di urea e creatinina. Questo potrebbe essere stato pre-renale, dato che il consumo di cibo e bevande era stato ridotto. Un'epatopatia marcata è stata indicata da un aumento marcato (6 volte il limite superiore della norma) della gamma-glutamil transferasi (GGT), con un moderato aumento (3 volte il limite superiore della norma) dell'attività della glutamato deidrogenasi (GLDH) epatocellulare (Tabella). Il calcio totale, il beta-idrossibutirrato, il calcio, il magnesio, l'aspartato aminotransferasi (AST), la creatina chinasi e la lipasi pancreatica erano entro i valori di riferimento. I cambiamenti nella patologia clinica si sono sostanzialmente deteriorati dal giorno 1 al giorno 5. C'è stato un lieve deterioramento dell'anemia e dell'ipoproteinemia. Una prognosi negativa è stata indicata dallo sviluppo di una deviazione a sinistra degenerativa al giorno 5, con una lieve neutropenia, un aumento delle bande a un conteggio superiore rispetto ai neutrofili segmentati (deviazione a sinistra degenerativa) e lievi cambiamenti tossici nei neutrofili sui campioni di sangue. L'eosinofilia è peggiorata fino a una gravità moderata. Si è sviluppata una lieve rubricitosis. Inoltre, la gravità dell'azotemia è raddoppiata. Tuttavia, a causa della difficoltà di raccogliere un campione di urina, non è stato possibile determinare la capacità di concentrazione tubulare renale. La patologia epatobiliare si è deteriorata con un aumento di un terzo dell'attività della GGT, mentre l'attività della GLDH epatocellulare è diminuita del 15%. La lipasi pancreatica è raddoppiata, si è sviluppata una lieve chetonemia e si è verificato un ulteriore lieve aumento della glicemia. Purtroppo, il laboratorio di patologia clinica non è stato in grado di ri-analizzare il fosfato in quanto era a corto di reagente. Il settimo giorno, ci sono stati pochi ulteriori cambiamenti degni di nota nei parametri di patologia clinica. L'anemia era leggermente peggiorata. Tuttavia, il leucogramma era in gran parte normalizzato, sebbene ci fosse una monocitosi persistente e si fosse sviluppata una lieve linfocitosi. La chetonemia era lieve, sebbene le chetoni fossero raddoppiate. La lipasi pancreatica era normalizzata. La flottazione fecale con la tecnica di McMaster è stata effettuata il giorno del ricovero, senza che venissero rilevati uova di nematodi. La ridotta sensibilità di questa tecnica rispetto alla tecnica di Stoll modificata è riconosciuta []. Tuttavia, se si prevedono elevati conteggi, come nel caso di un carico di nematodi gastrointestinali che causano malattie cliniche, la tecnica di McMaster può comunque essere appropriata []. La sedimentazione fecale non è stata richiesta il primo giorno di ricovero, poiché, a causa della storia di recente trattamento con albendazolo, non si sospettava un'infestazione da tenia adulta. La flottazione fecale è stata ripetuta e la sedimentazione è stata effettuata poiché la combinazione di anemia, aumento dell'attività degli enzimi epato-biliari e aumento dell'eosinofilia ha reso l'infestazione da F. hepatica una diagnosi differenziale più probabile. Ancora una volta, non sono state rilevate uova di nematodi. Tuttavia, erano presenti uova di F. hepatica. Le feci sono state valutate per la presenza di sangue occulto, compatibile con ulcerazione del terzo compartimento (TCU), con esito negativo. Tuttavia, a causa della ridotta produzione di feci, non è stato possibile fornire il campione di 50 g richiesto, riducendo la sensibilità del test. È stato anche riconosciuto che il valore predittivo negativo del test del sangue occulto nelle feci per TCU nei camelidi è discutibile [] Sono stati posti in dubbio l'ostruzione gastrointestinale o la peritonite secondaria a perforazione di un TCU o di altra fonte, coerenti con i segni di presentazione di dolore addominale e ridotta produzione di feci. Le radiografie addominali laterali, in posizione eretta e non sedati, hanno dimostrato un moderato ingrossamento del terzo compartimento e una normale interfaccia tra il gas e il tessuto molle nello stesso compartimento. Più focolai di opacità minerale sovrapposti all'aspetto ventrale del terzo compartimento. Non vi erano opacità gassose extra-compartimentali o evidenza di scarsa definizione serosale, che facessero pensare a un versamento peritoneale. Questi risultati sono stati interpretati come una lieve dilatazione del terzo compartimento, senza evidenza di ostruzione meccanica o peritonite. È stato eseguito un esame ecografico addominale. La fibra non è stata tagliata, ma piuttosto separata alla pelle, e è stato applicato spirito chirurgico direttamente alla pelle della parete addominale. L'interfaccia pleurica caudale e il fegato sono stati prima visualizzati attraverso la nona, decima e undicesima finestra intercostale, senza che fossero identificate anomalie. All'interno di ciascuno di questi spazi, la sonda è stata spostata ventralmente fino a quando è stato possibile visualizzare il terzo compartimento dello stomaco (C3). Non è stata identificata alcuna interruzione dell'integrità della parete di C3, indicativa di TCU, né alcun fluido extracompartimentale o gas che facesse pensare a una perforazione del compartimento. Sono stati visualizzati i tratti intestinali inferiori caudali rispetto a C3. La motilità è stata soggettivamente ridotta. Una massa irregolare di forma allungata è stata identificata nell'addome ventrale destro, adiacente alla parete addominale. L'aspetto era simile al parenchima epatico, ma era leggermente eterogeneo in ecogenicità. Quando la sonda è stata spostata cranially lungo la massa, è apparsa contigua al fegato, ma sporgeva caudale all'arco costale. Nei camelidi del nuovo mondo, il fegato è normalmente visibile solo intercostalmente []. Sono stati visualizzati anche i reni, la vescica intatta, la milza e la parete di C1, senza che fossero rilevate anomalie. Non è stato rilevato un eccessivo fluido peritoneale libero durante l'esame ecografico. Si è proceduto all'aspirazione con ago sottile della massa addominale, sotto guida ecografica. L'alpaca è stata trattenuta senza sedazione mentre veniva effettuata la cushing e un'area di fibra è stata tagliata dalla parete addominale sovrastante la massa. La pelle è stata preparata con scrub di clorexidina, seguita da alcool chirurgico. La massa è stata localizzata e un ago da 1,5" da 18 g è stato attaccato a una siringa da 2 ml introdotta accanto alla sonda, attraverso la parete del corpo e nella massa fino a quando è stato possibile ottenere un'immagine all'interno della massa. La pressione negativa è stata applicata usando la siringa e l'ago è stato reindirizzato all'interno della massa. La pressione negativa è stata rilasciata e l'ago è stato ritirato. Il contenuto dell'ago è stato poi espulso su un vetrino e spalmato su un secondo vetrino. Il processo di aspirazione con ago sottile è stato ripetuto due volte. I campioni spalmati, asciugati all'aria, sono stati sottoposti a esame citologico. I risultati citologici erano in effetti coerenti con cellule di origine epatica, con cluster o fogli di cellule epiteliali grandi, epiteliali, monomorfe, poligonali con citoplasma basofilo che conteneva occasionalmente piccole quantità di granuli pigmentati blu-verdi, coerenti con la bile e conteneva molteplici focolai di necrosi da 0,3 a 3 cm di diametro, circondati da un bordo emorragico. Inoltre, erano presenti aree pallide e rosse lineari di possibile fibrosi ed emorragia, sparse in tutto il parenchima epatico, coerenti con le tracce di migrazione dei parassiti. I dotti biliari erano dilatati con pareti ispessite e, nelle sezioni trasversali, contenevano vermi immaturi all'interno dei loro lumi. Oltre ai cambiamenti epatici, l'animale soffriva anche di una peritonite fibrinosa e pericardite, congestione ed edema della mucosa di C3 e del duodeno, ingrossamento dei linfonodi epatici, mesenterici e tracheobronchiali e emorragie petecchiali multifocali nei tessuti sottocutanei del torace, nei muscoli del collo e nella pleura. Istologicamente, oltre l'80% delle sezioni epatiche selezionate presentava un'alterazione grave o molto grave dovuta a cambiamenti infiammatori. Multifocalmente, vi era una perdita completa dell'architettura normale, che veniva sostituita da un numero elevato di cellule infiammatorie (per lo più eosinofili, con pochi linfociti e neutrofili) e detriti cellulari, circondati da un bordo emorragico. Multifocalmente, vi era un'estesa individualizzazione e perdita di epatociti, con una corrispondente alterazione grave dell'architettura del cordone. Multifocalmente, fino alla coalescenza, vi era un aumento notevole del numero di cellule infiammatorie miste all'interno dei sinusoidi. Multifocalmente, fino alla coalescenza, vi era una proliferazione moderata o marcata di fibroblasti (fibrosi). Le microfotografie dei vetrini istopatologici sono state scattate con un microscopio Olympus BX43, una fotocamera HD Chrome Exofocus e il software di imaging TCapture. Poiché l'ematologia e la biochimica hanno dimostrato processi infiammatori (ad esempio, leucocitosi, spostamento a sinistra degenerativo e iperglobulinemia) che avrebbero potuto essere causati da un'infezione, l'alpaca è stata mantenuta in ospedale con amoxicillina potenziata una volta al giorno (7 mg/kg di amoxicillina, 1,7 mg/kg di acido clavulanico, per via intramuscolare). Le è stato inserito un catetere intravenoso nella vena giugulare e le è stato somministrato esomeprazolo (0,4 mg/kg, per via intravenosa) una volta al giorno per trattare e prevenire la TCU. Inizialmente, non è stato somministrato alcun farmaco antinfiammatorio non steroideo a causa dei timori che la TCU fosse la possibile causa del dolore addominale che presentava. Invece, è stato somministrato buprenorfina (0,01 mg/kg) per via intravenosa. Ciò ha provocato una grave disforia, con vocalizzazione e attività frenetica. Successivamente, è stato somministrato meloxicam una volta al giorno per alleviare il dolore (0,25 mg/kg, per via intravenosa). Quando sono stati sollevati timori riguardo a una fasciolosis cronica o acuta, l'alpaca è stata trattata con triclabendazolo (15 mg/kg, per via orale). L'ottavo giorno, quando le sue condizioni cominciarono a peggiorare, gli vennero somministrati liquidi per via endovenosa (soluzione di Hartmann, 6 ml/kg/ora) e gli venne fatta una trasfusione di sangue. Questo venne raccolto dall'alpaca sana e messo in una sacca da prelievo di sangue pre-citrata da 450 ml. A causa della mancanza di cooperazione da parte dell'alpaca donatrice, si riuscirono a raccogliere e a consegnare solo 300 ml di sangue intero. Inizialmente, le condizioni dell'alpaca migliorarono. Fu osservato che si alzava facilmente o che si muoveva piuttosto che giacere in una posizione semi-laterale e mangiare una piccola quantità di fieno e mangime concentrato. Purtroppo, il sesto giorno di ricovero cominciò a deteriorarsi. Tornò a trascorrere lunghi periodi sdraiato in una posizione laterale o semi-laterale con gli arti parzialmente o completamente estesi. Divenne completamente anoressico. L'ottavo giorno, assunse una posizione completamente laterale e non fu in grado di alzarsi, con una frequenza cardiaca di 128 battiti al minuto. Rispetto al primo giorno, si è verificata una diminuzione approssimativa sia dell'ematocrito che delle proteine totali del 15%, che suggerisce una lieve emorragia. Le sue condizioni non migliorarono, nonostante le cure di supporto, e fu sottoposto a eutanasia con un'overdose di barbiturici per via endovenosa (100 mg/kg). L'esame post mortem stabilì che la causa della morte era probabilmente una fasciolosi acuta. Anche l'alpaca di accompagnamento è stato trattato con triclabendazolo (15 mg/kg, per os) e le sue feci sono state raccolte per flottazione e sedimentazione. Erano presenti 50 uova di strongyloidi per grammo, nonché un'uovo di fluke. Le misure di controllo di Fluke sono state successivamente discusse con il proprietario, tra cui la profilassi chimica, il conteggio regolare delle uova fecali e, se possibile, l'identificazione e la recinzione degli habitat di Fluke per ridurre la dipendenza dai fasciolicidi.