In un paziente di 72 anni affetto da cirrosi epatica, stadio A secondo Child-Pugh, con una storia di diabete di tipo 2 e infezione cronica da virus dell'epatite C (HCV, genotipo 1B), inizialmente diagnosticata 13 anni fa, è stato rilevato un tumore al fegato. Gli enzimi epatici erano leggermente elevati con alanina aminotransferasi 89 U/L (riferimento: 10-50 U/L) e aspartato aminotransferasi 65 U/L (riferimento: <50 U/L). Il tumore di 4 cm è stato rilevato mediante ecografia di routine e rimosso mediante resezione laparoscopica del segmento epatico. L'analisi morfologica, l'immunoistochimica e il sequenziamento di nuova generazione (NGS) sono stati applicati su sezioni tumorali rappresentative come descritto. La tabella e la figura illustrano i risultati istopatologici e molecolari in 14 aree tumorali individuali, che sono state raggruppate in tre regioni tumorali (A, B e C) in base alle loro caratteristiche morfologiche e molecolari predominanti. In sintesi, è stato diagnosticato un carcinoma epatocellulare/colangiocellulare combinato, eterogeneo, a livello di tumore T1 grado 2-3. È stata rilevata un'espressione eterogenea intra-tumorale di cinque marcatori cellulari epatici (CK7, CK19, glutamina sintetasi, p53, β-catenina) tra cui una doppia positività per glutamina sintetasi, β-catenina nucleare e p53 nella regione tumorale A. Il sequenziamento di nuova generazione è stato eseguito con una copertura minima di 1329 (SD ± 725) letture per amplicone di ogni singola area tumorale. I risultati del sequenziamento hanno mostrato una mutazione p.D32V (c.363 A > T) e una mutazione del sito di splicing di TP53 ivs8-1 (c.783-1 G > A) nell'area A del tumore. Confrontando le frequenze degli alleli mutati, le copie dei geni CTNNB1 e TP53 hanno mostrato un intervallo simile di entrambe le frequenze nell'area A1-3.