Un gatto maschio di 9 anni, castrato, è stato presentato nel novembre 2020 con una storia di 1 mese di gonfiore dei tessuti molli sul lato destro del viso. La lesione aveva una superficie infiammata e produceva una scarica bianca quando veniva incisa con un ago. Il gatto è stato trattato con un antibiotico (amoxicillina, 20 mg/kg, BID, per 8 d) e corticosteroidi (orali, 0.3 mg/kg, BID, per 8 d). Nel gennaio 2021, il gatto è stato portato in ospedale a causa di un aumento del gonfiore della lesione. La lesione è stata rimossa chirurgicamente in anestesia generale. L'escissione completa della massa è stata difficile a causa della limitata disponibilità di pelle, e una parte della lesione è rimasta nell'area circostante. Sono state osservate strutture bianche estranee sulle superfici dei tessuti asportati. L'esame istopatologico ha rivelato molteplici sezioni di vermi, portando alla diagnosi di infezione elmintica. Al gatto è stata somministrata la soluzione spot-on Broadline® (Merial, Giappone), un prodotto combinato comprendente praziquantel, eprinomectina, fipronil, (S)-metoprene quattro volte al mese. Tuttavia, il gatto ha continuato a grattarsi il viso. Gli è stato applicato un collare elisabettiano e sono stati somministrati corticosteroidi (1 mg/kg, SID, PO) per 1 anno, per alleviare il prurito. Nel gennaio 2022, le lesioni si erano ulteriormente diffuse. I tessuti bioptici delle lesioni cutanee sono stati fissati in formalina tamponata al 10% e trasformati in blocchi di paraffina seguendo procedure di routine. I tessuti incastrati nella paraffina sono stati tagliati in sezioni di 5 μm e colorati con colorante ematoxilina ed eosina. L'osservazione microscopica ha mostrato numerose sezioni di vermi di varie dimensioni e forme nel tessuto sottocutaneo, che si estendevano nei muscoli intracutanei e nel derma appena sotto l'epidermide. I vermi erano circondati da macrofagi, neutrofili, linfociti e cellule plasmatiche, con conseguente infiammazione granulomatosa. Questi vermi sono stati caratterizzati come acefali senza rostello e ventose, con tegumento che presenta microtrichi, parenchima con numerosi corpi calcarei, canali escretori allargati all'interno di uno stroma sciolto, simmetria bilaterale e muscolatura irregolarmente sviluppata. Sulla base di questi elementi, i vermi sono stati identificati come spargana proliferativi di S. proliferum. Dal DNA estratto da due sezioni paraffinate fissate in formalina, utilizzando il kit GeneRead DNA FFPE (Qiagen) secondo il protocollo del produttore, sono stati ottenuti rispettivamente 420 e 1.460 ng di DNA con rapporti A260/A280 (assorbimento a 260 nm e 280 nm) di 1,92 e 1,86. Dal DNA estratto da entrambe le sezioni è stata preparata una libreria di sequenziamento Illumina (100 ng) utilizzando il kit Illumina DNA Library Prep (Illumina) secondo il protocollo del produttore. Le librerie sono state sequenziate su MiSeq con il reagente MiSeq v3 producendo 300 bp di sequenze a doppio filamento. I dati di sequenziamento grezzo di 4,2 e 3,9 Gbp sono stati depositati con il codice DDBJ BioProject no. PRJDB16823. La profilazione metagenomica delle sequenze totali è stata effettuata utilizzando CCMetagen []. I risultati hanno indicato che circa il 47% delle sequenze erano di Cestoda, circa il 38% di Mammalia (principalmente Felis) e circa il 17% di Drosophila. Circa il 20% delle sequenze di Cestoda è stato classificato a livello di genere (Spirometra). Per identificare le specie, abbiamo estratto le sequenze mitocondriali dal set di dati metagenomici e costruito i genomi mitocondriali utilizzando il flusso di lavoro GetOrganelle []. Le librerie sono state sequenziate su MiSeq con il reagente MiSeq v3 producendo 300 bp di sequenze a doppio filamento. Il genoma mitocondriale circolare (accesso no. ERZ21839573) era lungo 13.643 bp e mostrava una somiglianza elevata (87-99%) con le sequenze mitocondriali di Spirometra spp. È stato generato un albero di massima verosimiglianza utilizzando il gene della subunità I della citocromo c ossidasi (1.566 bp) dei mitocondri con 71 sequenze depositate come gene della subunità I della citocromo c ossidasi di Spirometra spp. nel repository di sequenze L'albero mostrava sei cluster ben definiti corrispondenti a specie separate con un chiaro schema geografico come descritto da Kuchta et al. [] La sequenza mitocondriale ottenuta in questo studio è stata collocata nel mezzo del cluster di S. mansoni con una identità del 100% con quella proveniente dalla Cina (accesso no. KY114886). I risultati dell'esame sono stati presentati al proprietario con la necessità di un ulteriore intervento chirurgico; tuttavia, il proprietario ha rifiutato. Il gatto è stato portato in ospedale il 16 aprile 2022. La lesione sul lato destro si estendeva da sotto l'occhio al naso e alla guancia e si diffondeva ulteriormente fino all'angolo interno dell'occhio destro. Quando la lesione è stata incisa, sono stati osservati numerosi spargana mobili, bianchi, ghiandolari e di forma irregolare nel tessuto sottocutaneo e sulla superficie della pelle. La lesione è stata completamente asportata e la chirurgia del lembo cutaneo è stata eseguita sulla testa. Durante l'intervento, è stata somministrata una diluizione cinque volte superiore di praziquantel nel normale tessuto sottocutaneo dopo aver rimosso la lesione per diversi minuti. Il 30 aprile 2022, le suture sono state rimosse. Il praziquantel (0,5 ml/kg) è stato somministrato per via sottocutanea sulla scapola, con due dosi somministrate il 30 aprile 2022 e due mesi dopo. A partire da ottobre 2023, non si è verificata alcuna recidiva della lesione nel sito chirurgico.