Il probando era un bambino cinese di 5 anni ricoverato in ospedale con una lamentela principale di disturbi dell'articolazione del linguaggio da 1,5 anni, movimenti scoordinati per sei mesi e ripetuti episodi di convulsioni per una settimana. Un balbuzio era stato notato senza cause evidenti un anno e mezzo prima, e aveva gradualmente sviluppato un'enunciazione poco chiara, un linguaggio goffo e una risposta lenta. Negli ultimi 6 mesi, aveva iniziato ad avere movimenti scoordinati, come atassia e andatura instabile. Tre episodi di convulsioni generalizzate tonico-cloniche si erano verificati nella settimana immediatamente precedente la visita clinica; ogni episodio durava circa 1 minuto e si verificava circa una volta ogni due giorni. Aveva raggiunto le tappe dello sviluppo appropriate prima dei 3,5 anni e era nato a termine con parto vaginale senza complicazioni. Non era stato esposto ad alcol o farmaci durante la gravidanza, e i punteggi di Apgar erano stati 10 e 10 a 1 e 5 minuti, rispettivamente. I suoi genitori non avevano consanguineità nota, e sia loro che una sorella maggiore erano sani. All'esame obiettivo, la lunghezza, il peso e la circonferenza della testa erano normali per l'età, e lui era cosciente e mostrava una normale forza muscolare e tono muscolare. Il riflesso rotuleo e il riflesso del tendine di Achille erano normali, e i segni di Babinski erano negativi. Era inarticolato e rispondeva alle domande lentamente. Non riusciva a completare il test del movimento alternato della mano, il test calcagno-ginocchio-tibia o il test dito-naso a causa della scarsa cooperazione con le istruzioni. Il valore del quoziente di intelligenza, misurato con il test di Raven combinato, era di 80 (un livello medio). I test per l'acido lattico nel sangue, l'omocisteina, l'ammoniaca, la ceruloplasmina e la funzionalità epatica e renale erano normali. I test per gli anticorpi per encefalite autoimmune nel liquido cerebrospinale e nel sangue erano negativi. Lo screening per le malattie metaboliche genetiche nel sangue e nelle urine non mostrava anomalie evidenti. Un elettroencefalogramma (EEG) mostrava molte punte e scariche ad onde lente bilateralmente. Una scansione cerebrale MRI mostrava elevate iperintensità adiacenti ai corni posteriori bilaterali dei ventricoli laterali sulle immagini pesate in T2 e fessure cerebellari allargate. Il sequenziatore NextSeq500 (Illumina Inc., USA) è stato utilizzato per analizzare gli esoni nei geni correlati alle leukoencefalopatie ereditarie. I geni presenti nel pannello sono elencati nel file supplementare. I dati ottenuti sono stati analizzati utilizzando il software di accompagnamento e le varianti sono state denominate secondo il protocollo. Le varianti sono state interpretate secondo le linee guida dell'American College of Medical Genetics and Genomics e il fenotipo del paziente. La sequenziazione diretta ha convalidato le mutazioni missenso rilevate. La sequenziazione diretta è stata effettuata sul DNA del probando e dei suoi genitori utilizzando il sequenziatore ABI3500 (Life Technology, USA), e i campioni sono stati sottoposti ad analisi della sequenza utilizzando il Sequence Scanner v1.0 (Applied Biosystems, USA). I controlli cinesi corrispondenti sono stati ottenuti dal laboratorio clinico di Shenyang Kingmed (Shenyang, Cina). La procedura di sequenziamento e la convalida della mutazione sono state effettuate dal laboratorio clinico di Shenyang Kingmed (Shenyang, Cina), che fornisce servizi di ispezione di terze parti. I possibili effetti delle mutazioni sulla funzione delle proteine sono stati analizzati utilizzando lo strumento di previsione Polymorphism Phenotyping v2 (PolyPhen-2) (), SIFT () e MutationTaster (). L'analisi genetica ha mostrato che il probando aveva una mutazione missenso omozigote c.892G > A (p.Glu298Lys) (sequenza di riferimento: NM_017882.2) nell'esone 7 di CLN6 e che entrambi i suoi genitori erano eterozigoti per la mutazione. La mutazione non è stata rilevata in 259 soggetti di controllo. È stata diagnosticata LINCL e è stato eseguito un test visivo che non ha mostrato anomalie evidenti. Le analisi di PolyPhen-2, SIFT e MutationTaster hanno suggerito che la mutazione avrebbe influenzato negativamente la funzione della proteina (Tabella). La mutazione nel paziente è la prima segnalata e possiamo definirla recessiva. A causa della storia di crisi e dei risultati dell'EEG, al paziente fu diagnosticata un'epilessia e fu prescritto il valproato di sodio (VPA) per via orale. La somministrazione di VPA fu iniziata a 15 mg/kg al giorno, somministrata in due dosi, aumentando a circa 25 mg/kg al giorno in 2 settimane. L'intervallo di concentrazione nel sangue fu di 56-78 μg/ml in 6 mesi. Al follow-up di 6 mesi, gli episodi si ridussero a circa una volta al mese, i disturbi dell'articolazione e i movimenti scoordinati persistevano e non fu rilevata alcuna perdita della vista. Nel locus di CLN6, sono state analizzate 31 mutazioni missenso, incluse quelle segnalate e le nostre; il 22,6% (7/31) era localizzato nei domini citoplasmatici, il 32,2% (10/31) nei domini TM e il 45,2% (14/31) nei domini luminali della proteina. Per quanto riguarda ciascun dominio della proteina, le mutazioni erano per lo più localizzate nel loop TM3-TM4 (6/31), nel loop TM1-TM2 (4/31) e nel C-terminus (4/31), e non sono state segnalate mutazioni nel loop TM4-TM5, nel loop TM5-TM6 e nel dominio TM7 (Tabella).