Un uomo di 61 anni, precedentemente in buona salute, si è presentato da un dottore locale lamentando una massa sulla sua testa. Fu indirizzato al reparto di neurochirurgia del nostro ospedale per sospetto di un tumore nel cranio. Fu eseguita una risonanza magnetica della testa con un dispositivo a 3 T (GE DISCOVERY MR750; GE Healthcare) con un agente di contrasto a base di gadolinio, e fu sospettato un tumore metastatico. L'esame del sangue mostrò un alto livello di antigene specifico della prostata di 165.42 ng/mL, e una tomografia computerizzata rilevò lesioni litiche dell'osso pelvico adiacente alla prostata anormalmente ingrandita.. La scintigrafia ossea con 99mTc-idrossimetilene-difosfonato rivelò metastasi ossee multiple in tutto il corpo. Il paziente fu ulteriormente indirizzato al nostro reparto per sospetto di metastasi ossee multiple da cancro alla prostata. Una biopsia dell'ago della prostata del paziente ha rivelato un adenocarcinoma con un punteggio di Gleason di 5 + 4 = 9, che ha richiesto un ADT. Un anno dopo l'inizio dell'ADT, sono stati osservati un aumento del livello dell'antigene prostatico specifico e un insufficienza postrenale dovuta a ritenzione urinaria, e quindi è stata eseguita una resezione transuretrale del canale della prostata (TURP). Il docetaxel è stato somministrato per un totale di sette cicli, poiché si riteneva che il tumore del paziente avesse acquisito resistenza alla castrazione. Tuttavia, sono state esacerbate le metastasi multiple dei linfonodi e delle ossa. Sebbene fossero già stati somministrati un totale di sei cicli di cabazitaxel, è stato interrotto a causa di un'infezione da ulcera da pressione sacrale e di un deterioramento delle condizioni generali del paziente. Successivamente è stato trattato con abiraterone, ma è morto due anni e sei mesi dopo la diagnosi di cancro alla prostata utilizzando campioni raccolti tramite TURP. Sono state rilevate la co-delezione di RB1 e BRCA2 e una mutazione troncante di TP53 (G244Rfs*19). È stata osservata l'amplificazione del gene del recettore degli androgeni (AR) con un numero di copie stimato di 18.3. Inoltre, è stata rilevata una mutazione puntiforme di patched 1 (PTCH1) (p.R441H) come alterazione possibilmente patogena. La colorazione immunoistochimica è stata effettuata utilizzando protocolli standard. I prodotti degli anticorpi e i protocolli dettagliati sono mostrati nel file aggiuntivo. Tutte le sezioni colorate sono state scansionate utilizzando uno scanner digitale di diapositive ad alta risoluzione (NanoZoomer-XR C12000; Hamamatsu Photonics, Hamamatsu, Shizuoka, Giappone), che consisteva in una telecamera con sensore trilineare, un rivelatore di 4096 pixel × 64 linee × 3 lastre e un filtro che divideva solo in RGB con un prisma. La risoluzione misurata di tutte le immagini di microscopia era di 0,23 μm/pixel, che era equivalente a 40 × obiettivo. La colorazione con ematoxilina ed eosina ha mostrato che le cellule tumorali avevano nucleoli chiari e un'istologia diversa da quella delle tipiche cellule di cancro della prostata neuroendocrino per confermare se il segnale di hedgehog fosse potenziato da una mutazione di PTCH1 nel nostro caso. Le cellule tumorali positive a GLI1 rappresentavano meno del 10% del totale (file aggiuntivo: Fig. S1H) e la colorabilità nucleare delle cellule non era più forte di quella delle cellule di Leydig usate come controllo positivo (dati non mostrati), indicando che il segnale di hedgehog non era potenziato.