Un chien berger allemand mâle de 11 ans, intact (GSD) a été référé au service d'urgence du Département des sciences cliniques des animaux de compagnie de la Faculté de médecine vétérinaire de l'Université d'Utrecht avec une histoire de 2 jours de début aigu de dyspnée et de faiblesse généralisée. La vaccination et la vermifugation ont été effectuées régulièrement. Le chien avait visité l'Europe du Sud 6 mois avant la présentation. Aucun médicament n'a été administré avant le développement des signes cliniques et aucune circonstance environnementale qui pourrait causer une dyspnée (par exemple, tabac, exposition à un solvant organique, poussière) n'a été rapportée. L'examen physique a révélé un chien réceptif mais léthargique, présentant une faiblesse généralisée, une dyspnée sévère, des muqueuses cyanosées, un temps de remplissage capillaire prolongé, des pouls périphériques faibles, une tachycardie (fréquence cardiaque de 180 battements/min) et un murmure systolique de grade 1 sur 6, avec un point d'intensité maximale au-dessus du sommet cardiaque droit. Des bruits pulmonaires durs ont été entendus à l'auscultation pulmonaire. La numération formule sanguine complète (NFC) a révélé une leucocytose mature modérée (leucocytes: 18,9 × 109/L; intervalle de référence 4,5–14,6 × 109/L) et un hématocrite de 56 % (intervalle de référence 42–61 %). La biochimie n'a révélé aucune anomalie. L'analyse des gaz du sang artériel a révélé une hypoxémie sévère (PaO2: 48,5 mm Hg; intervalle de référence 85–103 mm Hg) et une hypocapnie modérée (PaCO2: 27,0 mm Hg; intervalle de référence: 32–43 mm Hg). La cause présumée de l'hypocapnie était l'hyperventilation. Les concentrations de D-dimères et d'antithrombine étaient dans les intervalles de référence. Le test de dépistage rapide de l'infection par le ver du cœur (Dirofilaria immitis) (SNAP® Heartworm RT Test, IDEXX Laboratories) et l'examen des selles (technique de flottation et d'isolation larvaire de Baermann) ont été négatifs. Les radiographies thoraciques ont montré une dilatation du tronc de l'artère pulmonaire et une cardiomégalie du côté droit L'échocardiographie a été fortement compliquée par l'anxiété sévère et le halètement du chien et a donc été limitée. Elle a montré une dilatation sévère du ventricule droit, une dilatation uniforme modérée de l'artère pulmonaire principale, un aplatissement systolique du septum inter-ventriculaire et une régurgitation tricuspide modérée. L'application de l'équation de Bernoulli modifiée à la vitesse du jet de régurgitation tricuspide a montré une pression artérielle pulmonaire systolique estimée de 77 mm Hg, classée comme PH sévère (référence < 25 mm, PH sévère > 75 mm Hg) ([]) Les dimensions du ventricule gauche ont été considérablement réduites, ce qui correspond à une déplétion du volume du côté gauche. Une échocardiographie de contraste salin a été réalisée, qui a été négative, excluant ainsi toute déviation intra- et extra-cardiaque droite-gauche. Pour remédier à l'hypoxémie sévère et au PH, le chien a été placé dans une cage à oxygène avec une concentration d'oxygène inspiré comprise entre 40 et 50 %. En outre, 1,5 mg/kg/8 h de sildenafil oral (Viagra®, Pfizer, New York, USA) et 0,25 mg/kg/12 h de pimobendan oral (Vetmedin®, Boehringer Ingelheim, Allemagne) ont été administrés. Cette thérapie n'a pas affecté de manière significative l'état clinique du chien. Cependant, l'hypoxémie artérielle s'est légèrement améliorée après le premier jour de thérapie (PaO2 a augmenté de 48,5 à 53 mm Hg, intervalle de référence 85-103 mm Hg). L'échocardiogramme a été répété le troisième jour de thérapie et les changements échocardiographiques et la sévérité du PH ont été considérablement réduits. La dilatation ventriculaire droite a diminué de façon spectaculaire, le septum inter-ventriculaire n'a plus été aplati et le gradient de pression de la régurgitation tricuspide a été réduit de 77 mm Hg à 41 mm Hg (référence < 25 mm Hg). Par conséquent, la thérapie avec pimobendan et sildenafil a été poursuivie pendant la période d'hospitalisation (7 jours). Ensuite, quatre jours après la première consultation, des examens de diagnostic complémentaires ont été réalisés, à savoir une tomographie par ordinateur (CT) pré- et post-contraste avec apnée, suivie d'une biopsie pulmonaire chirurgicale sous anesthésie. Un scanner de tomographie par ordinateur (Philips Secura, Philips NV, Eindhoven, Pays-Bas) à coupe hélicoïdale a été utilisé. Les paramètres techniques comprenaient des coupes hélicoïdales de 3 mm, 120 kV, 200 mA, 292 mm de champ de vision, matrice de 512 × 512 et algorithme de haute fréquence spatiale. Les images de tomographie par ordinateur montraient un parenchyme pulmonaire présentant de subtils nodules de verre dépoli centrilobulaires et une artère pulmonaire dilatée. Les lignes septales, l'épanchement pleural et la lymphadénopathie étaient absents. Les résultats de la tomographie par ordinateur étaient compatibles avec une PH sans diagnostic concluant. Après la tomographie par ordinateur, une biopsie pulmonaire du lobe pulmonaire gauche (3 × 2 cm) a été réalisée pour examen histopathologique avec une mini-thoracotomie. Immédiatement après cette procédure, une thérapie par dexaméthasone (0,25 mg/kg q24 h I.V., Rapidexon ®, Eurovet Animal Health, Bladel, Pays-Bas) a été initiée en dernier ressort, en attendant les résultats histopathologiques (3 jours). L’histopathologie de la biopsie chirurgicale du poumon a montré une pneumonie histiocytaire interstitielle chronique modérée d’étiologie inconnue et une atélastie par hématoxyline et éosin, acide périodique-Schiff et coloration de Van Gieson. Les modifications vasculaires n’ont pas été clairement identifiées au début. En raison de la faible réponse au traitement initié et du mauvais pronostic suspecté sur la base des résultats histopathologiques, le chien a été euthanasié. Une autopsie a été réalisée avec le consentement éclairé du propriétaire. La pathologie macroscopique des poumons a montré des poumons fermés modérément effondrés avec un aspect tacheté diffus avec de multiples foyers rouges foncés de 1 × 1 × 3 mm, et de petits nombres de foyers blancs de 1 × 1 × 1 mm, souvent entourés d'une zone rouge foncé (dégagement) distribuée de manière aléatoire dans tous les lobes pulmonaires. L'histopathologie de routine des poumons a montré une remodélisation vasculaire multifocale. Pour différencier les petites artères et les veines, ce qui est essentiel pour diagnostiquer la PVOD, une autre teinture qui met en évidence les fibres élastiques et le collagène (résorcin Fuchsin de Weigert) a été ajoutée pour identifier les lamines élastiques. Dans ce chien, comme chez les personnes atteintes de PVOD, les trois compartiments (artères, veines et capillaires) de la microcirculation pulmonaire ont été affectés, bien que les changements dans le système veineux pulmonaire étaient les plus prononcés. Les lésions veineuses comprenaient une prolifération intimale concentrique sévère, une obliteration partielle à complète des lumières et une recanalisation post-thrombotique. Les lésions capillaires étaient organisées en foyers, plus évidentes adjacentes aux veines remodelées et étaient caractérisées par une prolifération de cellules endothéliales plumb (similaire à PCH). La congestion segmentaire des capillaires alvéolaires était également régulièrement associée aux foyers de PCH. Les lésions artérielles ressemblaient à celles de l'HTAP avec un épaississement intimal concentrique par augmentation de la matrice extracellulaire et hypertrophie médiale, mais les lésions plexiformes complexes étaient absentes. Ces résultats étaient cohérents avec les résultats décrits par Williams et al. [] et donc l'équivalent humain de la PVOD. L'ADN génomique de l'affaire a été isolé à partir de sang EDTA en utilisant un robot d'extraction semi-automatisé Chemagen (PerkinElmer Chemagen Technologie GmbH) et a été stocké à -20 °C. Environ 6 ans plus tard, l'ADN génomique de l'affaire et un GSD sain non apparenté ont été analysés par séquençage du génome entier. L'intégrité de l'ADN a été vérifiée sur un Bioanalyzer (Agilent, Santa Clara, États-Unis) et quantifiée à l'aide de Qubit dsDNA HS (Thermo Fisher Scientific, Waltham, États-Unis). Des bibliothèques d'ADN ont été préparées à l'aide du kit de préparation de bibliothèque TruSeq Nano (kit de préparation de bibliothèque TruSeq Nano, Illumina, San Diego CA, États-Unis) en utilisant 200 ng d'entrée d'ADNg. Des informations de séquençage du génome entier à une couverture de 30 × ont été obtenues à l'aide d'un instrument HiSeqX Ten (instrument HiSeqX Ten, Illumina, San Diego CA, États-Unis) et de 2 × 150 lectures de paires d'extrémités de base. Les données ont été traitées avec notre pipeline interne v1.2.1 () incluant l'analyse de mutation somatique (Strelka, VarScan, FreeBayes, et MuTect) et un kit d'outils d'analyse du génome (GATK v. 3.2.2) [] selon les directives des meilleures pratiques []. Les séquences ont été cartographiées sur le génome de référence canin (CanFam 3.1) en utilisant l'alignement Burrows-Wheeler avec des correspondances exactes maximales (BWA-MEM) v0.7.5a [] suivi de doublons marqués, de fusion de bandes et de réalignement des indels. La réétalonnage de base n'a pas été effectué. Dans la médecine humaine, les mutations dans BMPR2, ACVRL1, ENG, KCNK3, CAV-1 et SMAD9 ont été suggérées comme étant la cause d'une forme autosomique dominante de PAH []. Ces gènes ont été inclus dans les analyses pour éviter les mutations candidates manquantes en raison d'une classification phénotypique erronée. La comparaison des cas et des contrôles, l'analyse de ces gènes a révélé 196 variantes intronales uniques. La comparaison de la séquence d'EIF2AK4 dans le cas et le GSD sain a révélé 124 variantes uniques, dont 9 étaient situées dans la 3`-UTR, 112 étaient intronales et 3 étaient exoniques. Le cas était homozygote mutant pour c.2961T>C et c.1266G>A, une variation hétérozygote a été trouvée à c.2092G>A. La validation des variantes a été effectuée par séquençage Sanger sur des produits de réaction en chaîne par polymérase amplifiés à partir d'ADN génomique en utilisant la polymérase Platinum Taq (Invitrogen). Après un traitement par exonuclease I, les séquences d'ADN ont été réalisées en utilisant BigDye v3.1, séquencées sur un ABI3130XL et analysées dans Lasergene (version 12.0 DNASTAR). Quatre des cinq GSD supplémentaires, inconnues pour toute forme de stress respiratoire et âgées de ≥ 10 ans, ont révélé le génotype identique au cas et ont donc été exclues en tant que variantes causales pour la PVOD.