Un patient de 73 ans a été référé par son dentiste généraliste pour une évaluation plus approfondie d'une lésion blanchâtre sur la gencive attachée et d'une péri-implantite associée. Une vue panoramique montre une perte osseuse alvéolaire généralisée et des dépôts de calculs dans la région péri-implantaire (n° 42, n° 43, n° 44), et la région antérieure et prémolaire de la mandibule droite a présenté une perte osseuse crestal péri-implantaire. Les résultats de laboratoire étaient dans les limites normales. Plusieurs autres situations d'élévation de la protéine oncogène, y compris la consommation de tabac et/ou d'alcool, l'absence de carences nutritionnelles, l'absence de signes d'exposition aux rayonnements ionisants, l'absence d'immunodéficience ou d'immunosuppresseur, et d'autres irritations de prothèses amovibles, ont toutes été exclues. Une lésion blanchâtre a été excisée, et l'échantillon a été envoyé à un pathologiste buccal. La surface de l'implant contaminé a été traitée au laser. Le diagnostic pathologique a été confirmé comme étant une candidose buccale. Le patient a subi un traitement au laser trois fois pour traiter la lésion péri-implantite. Un an plus tard, son implant des régions n° 42, n° 43 et n° 44 a été retiré en raison d'une péri-implantite à la clinique locale. D'après la lettre de référence de la clinique locale, le système d'implant était de type connexion par friction interne ayant une surface SLA, qui a été installé pendant plus de 10 ans. Environ 3 ans après l'opération au laser, une masse proéminente a été identifiée du côté lingual des régions #43 et #44. Une biopsie incisionnelle a été réalisée et a été diagnostiquée comme un SCC. Des examens complémentaires ont été réalisés, notamment des analyses de laboratoire, une radiographie thoracique, un ECG, une IRM, une TDM avec contraste, une TEP-TDM et une échographie du cou. Le patient a été diagnostiqué comme étant au stade IVA, cT4aN2cM0, selon le système de stadification TNM proposé par l'American Joint Committee on Cancer (AJCC, 2018). Il a été immédiatement programmé pour une opération comprenant une dissection sélective du cou, une résection de masse avec mandibulectomie marginale et une reconstruction avec un lambeau radial de l'avant-bras. Le rapport pathologique final a été un carcinome épidermoïde bien différencié, avec une tumeur de 1,5 × 2,0 cm, aucune métastase dans aucun des 27 ganglions lymphatiques régionaux et une marge de résection chirurgicale claire. Les invasions vasculaires et périnéurales n'ont pas été observées; ainsi, le patient a été diagnostiqué comme étant pT1N0M0, stade I. En particulier, plutôt que sur l'interface entre l'implant et l'os, les cellules tumorales sont apparues en premier sur la surface des tissus mous muqueux et ont pénétré profondément le long des fils de l'implant. Ni la radiothérapie adjuvante ni la chimiothérapie n'a été administrée au patient. Un ganglion lymphatique métastatique a été trouvé au niveau ipsilatéral droit IV sur une TDM améliorée prise 4 mois après l'opération. Une dissection du cou sélective, y compris au niveau IV droit, a été réalisée, et une nouvelle lésion suspecte de malignité a été trouvée au niveau du maxillaire droit. La lésion du maxillaire du patient a été confirmée comme étant un SCC par biopsie incisionnelle; il a donc subi une opération supplémentaire 13 jours après la deuxième dissection sélective du cou. Le rapport pathologique final sur la lésion maxillaire était un SCC bien différencié avec une tumeur de 2,0 × 1,4 cm; la profondeur d'invasion était de 0,7 cm. L'os sous-jacent était impliqué. Les marges de résection chirurgicale étaient claires. Les spécimens prélevés chirurgicalement ont été fixés dans du formol tamponné neutre à 10 %, traités selon un protocole standard, et des microplaques de différentes antisérums ont également été préparées pour la coloration immunohistochimique. Tous les fichiers de données du patient ont été sélectionnés parmi les fichiers du Département de chirurgie buccale et maxillo-faciale, de l'hôpital dentaire de l'université nationale de Séoul, sous l'approbation du comité d'examen institutionnel de l'université nationale de Séoul (S-D20170026). Le sang du patient a été prélevé avant l'opération, 10 jours après l'opération et 3 mois après l'opération. Après précipitation à température ambiante, les échantillons ont été centrifugés à 4000 tr/min pendant 20 minutes. Seuls les surnageants ont été collectés et mélangés à un tampon de lyse et utilisés pour une IP-HPLC. Nous avons appliqué 100 μg de chaque extrait de protéine à la procédure d'immunoprécipitation en utilisant une colonne d'agarose à la protéine A/G (Amicogen Co., Corée). Les colonnes d'agarose à la protéine A/G ont été préincubées séparément avec 1 μg de chacun des 20 antisérums différents, y compris p53, muc1, muc4, TGF-β1, survivin, Wnt1, E-cadhérine, β-caténine, métalloprotéine de matrice (MMP)-3, MMP-10, TNFα, HER1, HER2, PAI-1, NRAS, KRAS, CEA, Met, FASL, et ERb. En résumé, les échantillons de protéines ont été mélangés à 5 ml de tampon de liaison (150 mM NaCl, 10 mM Tris pH 7,4, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 0,2 mM vanadate de sodium, 0,2 mM PMSF, et 0,5 % NP-40) et incubés dans les colonnes d'agarose à la protéine A/G à 10 °C pendant 1 heure. Les colonnes ont été placées sur un agitateur rotatif pendant l'incubation. Après lavage de chaque colonne avec une quantité suffisante de solution PBS (pH 7,3, 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 43 mM Na2HPO4-7H2O, et 1,4 mM KH2PO4), la protéine cible a été éluée avec 150 μl de tampon d'élution d'IgG (Pierce Co., USA). Les protéines immunoprécipitées ont été analysées par HPLC (1100 series®, Agilent, USA) en utilisant une colonne en phase inverse et un système de détection microanalytique (SG Hightech Co., Corée), opéré avec une solution de NaCl à 0,15 M et 20 % d'acétonitrile pendant 30 minutes, et analysé par spectroscopie UV à 280 nm. Dans les résultats de l'IP-HPLC, les zones de pic de protéine obtenues à partir de l'analyse HPLC dans le contrôle négatif ont été utilisées pour éliminer la zone de pic de l'anticorps (mAU*s) [–]. Pour comparer les protéines sériques préopératoires et postopératoires, les zones de pic de protéine ont été normalisées proportionnellement par la valeur α-tubuline et ont été tracées sous forme de barre. Des extraits de protéines ont été préparés à partir de tissus tumoraux, 100 μg de chaque extrait de protéine pour la procédure d'immunoprécipitation en utilisant une colonne d'agarose de protéine A/G. Les colonnes d'agarose de protéine A/G ont été pré-incubées individuellement avec 1 μg de chacun des 9 différents antisérums, y compris TNFα, NRAS, HER2, Met, E-cadhérine, p53, survivine, TGF-β1, et NFκB. En résumé, les échantillons de protéines ont été mélangés avec 5 ml de tampon de liaison (150 mM NaCl, 10 mM Tris pH 7.4, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 0.2 mM vanadate de sodium, 0.2 mM PMSF, et 0.5% NP-40) et incubés dans les colonnes d'agarose de protéine A/G à 10 °C pendant 1 h. Pour comparer la protéine normale de la gencive et du tissu SCC, les valeurs de la surface du pic de la protéine ont été normalisées proportionnellement par la valeur α-tubuline et tracées sous forme de barre. Les résultats de laboratoire de routine ont été recueillis, y compris les numérations globulaires complètes (CBC) avec numération différentielle, les taux de protéine C-réactive (CRP) et la vitesse de sédimentation érythrocytaire (ESR). Une modeste élévation du taux de CRP plasmatique dans la fourchette observée chez les individus apparemment en bonne santé est un puissant indicateur prédictif d'événements vasculaires futurs []. Chen et al. [] ont rapporté que la présence d'un taux de CRP sérique préopératoire élevé (> 5,0 mg/L) est un indicateur pronostique indépendant du cancer de la bouche. Les résultats des tests d'échantillons de sang ont été comparés à partir de la première visite, préopératoire, postopératoire et au moment de la récidive. Les analyses IP-HPLC ont révélé que p53, E-cadhérine, β-catenine, MMP-10, HER2, NRAS, Met, et ERb avaient diminué au jour 10 post-opératoire. D’autres marqueurs de protéines liées à la signalisation oncogénique étaient en augmentation au jour 10 post-opératoire. Cela suggère que les protéines oncogéniques, telles que p53, E-cadhérine, β-catenine, MMP-10, HER2, NRAS, Met, et ERb ont été libérées de la tumeur primaire; par conséquent, les taux sériques de ces protéines oncogéniques ont diminué après la chirurgie ablative de la tumeur. 3 mois après l’opération, en utilisant le sérum du patient, tous les marqueurs de protéines oncogéniques étaient en augmentation et une récidive de la tumeur ou une métastase était suspectée. Les analyses IP-HPLC ont révélé que les niveaux de protéines oncogènes étaient sur-exprimés dans les tissus SCC par rapport aux tissus gingivaux normaux et aux tissus SCC, le nombre absolu de neutrophiles (ANC), la VS et la CRP étaient élevés immédiatement après l'opération. La CRP n'a pas été mesurée avant l'opération, et ces données ne peuvent donc pas être comparées à d'autres points dans le temps; cependant, les taux de CRP n'avaient pas changé de manière significative avant et après la deuxième opération (dissection sélective du cou au niveau IV droit, fichier supplémentaire: figure S1). Notamment, les taux de VS étaient élevés dans la période préopératoire, comme déterminé lorsque la lésion maligne a été confirmée par biopsie incisionnelle et comparée à un échantillon prélevé lors de la première visite. Cela indique que certaines réactions inflammatoires peuvent affecter le potentiel de transformation maligne. Les modifications périopératoires des globules rouges, de l'hémoglobine et de l'hématocrite ont montré que les taux avaient diminué pendant la période post-opératoire, mais ont eu tendance à se rétablir au fil du temps (Fichier supplémentaire: Figure S2). La proportion de neutrophiles segmentés a augmenté immédiatement après l'opération, ce qui est caractéristique des cellules des réactions inflammatoires aiguës, car elles se sont déplacées vers la plaie chirurgicale immédiatement après le traumatisme en quelques minutes. Les courbes des lymphocytes, des monocytes, des éosinophiles et des basophiles ont montré des tendances opposées à celles des neutrophiles segmentés (Fichier supplémentaire: Figure S3).