Un homme de 78 ans a été admis à l'hématologie de l'hôpital universitaire Sant'Andrea-Sapienza, en raison de la fatigue et des douleurs abdominales qui s'aggravaient. Le consentement éclairé écrit a été obtenu auprès du patient et l'étude a été approuvée par notre comité d'examen institutionnel. Le compte sanguin périphérique a montré une hyperleucocytose (WBC 118 × 109/L), une anémie (hémoglobine 8,6 g/dl) et une thrombocytopénie modérée (98 × 109/L), sans splénomégalie associée. Le frottis sanguin périphérique a montré une hypercellularité avec 90 % de blastes. L'examen morphologique de l'aspirat de moelle osseuse (MO) a montré 90 % de blastes non granulaires de taille moyenne et grande et l'analyse immunophénotypique réalisée sur un cytomètre de flux FACScalibur en utilisant un protocole standard a révélé que les blastes étaient CD34+, CD117+, CD33+, CD13+, HLA-DR+, CD2+ MPO+/−, CD7+/− []. Un diagnostic de LAM (M2) a été établi et le patient a commencé une cytoréduction avec de l'hydroxyurée, obtenant après sept jours de traitement une numération des globules blancs de 39 × 109/L. Un caryotype conventionnel a été réalisé sur l'aspirat de diagnostic BM après une culture de courte durée et analysé après bandage en G. La description du caryotype a été faite selon le système international de nomenclature cytogénétique humaine. L'analyse cytogénétique sur les métaphases bandées en G a révélé un caryotype 46,XY,t(9;22)(q34;q11). Des expériences de FISH interphasique ont ensuite été réalisées en utilisant des sondes BCR-ABL1 (Vysis) et ont démontré la présence du gène de fusion BCR-ABL1. Lors de la résolution d'une infection pulmonaire à Aspergillus traitée par Voriconazole, alors que les analyses cytogénétiques et moléculaires étaient en cours, le patient a commencé un traitement par 5-aza-2′-déoxycytidine (autrement appelée Decitabine, 20 mg/m2 pendant 5 jours) pour un total de deux cycles. Par la suite, la PCR en anneau a révélé la présence simultanée des isoformes communes p190 e1a2 et rares e6a2 Les produits de PCR, correspondant à l'amplification de BCR-ABL1 p190, ont été purifiés à partir de gel d'agarose (Kit de purification de PCR QIAquick - Qiagen) et directement séquencés sur un séquenceur ABI/Prism 3130 (Thermo Fisher Scientific) en utilisant le kit de séquençage BigDye® Terminator v3.1 Cycle (Thermo Fisher Scientific). La RQ-PCR pour l'analyse des transcrits BCR-ABL1 e6a2 a été réalisée en utilisant l'amorce directe Q-BCR_ex6_F (GATCCAACGACCAAGAACTCTCT), l'amorce inverse ENR561 et la sonde ENP541 rapportée ailleurs []. Les valeurs p190 e6a2 ont été normalisées sur le nombre de transcrits ABL1 et exprimées en nombre de copies p190 e6a2 pour 104 copies d'ABL1. Pour évaluer la réponse moléculaire après le traitement, un test de PCR quantitative en temps réel (RQ-PCR) pour p190 e6a2 a été conçu, par lequel nous avons observé une cinétique différente significative à travers les transcrits e1a2 et e6a2 avec une persistance cohérente de e6a2 [ ] Après le premier, le BM aspiré a montré 70 % de cellules de type blast et deux transcrits e1a2 et e6a2 étaient respectivement 3,09 et 5805,47/104 ABL1, tandis qu'après le deuxième cycle, les cellules de type blast étaient de 20 % et e1a2 et e6a2 5,71 et 5747,52. En raison d'une pancytopénie persistante et de la présence de blastes après deux cycles de décitabine et à la lumière des données moléculaires, le patient a ensuite été transféré à un traitement par TKI. Le traitement initial consistait en imatinib 600 mg/jour pendant deux semaines, qui a ensuite été réduit à 400 mg/jour en raison d'une neutropénie fébrile. Après un mois d'imatinib, la moelle osseuse présentait 60 % de cellules blastiques avec une légère amélioration de la thrombocytopénie. Le traitement a donc été remplacé par 100 mg/jour de dasatinib, mais il a été interrompu cinq jours plus tard en raison d'une embolie pulmonaire. Dix jours après l'arrêt du TKI, e1a2 et e6a2 étaient respectivement de 0,17 et 9477,16/104 ABL1. Après deux mois de traitement continu avec des TKI, une infiltration de la moelle osseuse était présente et les deux transcrits étaient e1a2 1,6 et e6a2 23727,06/104 ABL1 (Fig. Le patient, toujours réfractaire au traitement de deuxième ligne, est mort d'une infection pulmonaire.