Se remitió a un paciente de 73 años de edad desde su dentista general para una evaluación adicional de una lesión blanquecina en la encía adherida y la periimplantitis asociada. Una vista panorámica mostró una pérdida de hueso alveolar generalizada y depósitos de cálculos en la región periimplantar (#42, #43, #44), y el área anterior y premolar mandibular derecho mostró una pérdida de hueso crestal periimplantar. Los resultados de laboratorio estuvieron dentro de los límites normales. Se excluyeron otras situaciones de elevación de proteínas oncogénicas, incluido el uso de tabaco y/o alcohol, sin deficiencias nutricionales, sin hallazgos de exposición a radiación ionizante, sin inmunodeficiencia o inmunosupresor, y otras irritaciones por prótesis extraídas. Se extirpó una lesión blanquecina, y la muestra se envió a un patólogo oral. La superficie del implante contaminado se trató con un láser. El diagnóstico patológico se confirmó como candidiasis oral. El paciente se sometió a tratamiento con láser tres veces para tratar la lesión periimplantitis. Un año después, se le extrajo el implante de la zona #42, #43, y #44 debido a la periimplantitis en la clínica local. De la carta de remisión de la clínica local, se supo que el sistema de implante era de tipo de conexión por fricción interna que tenía una superficie SLA, que se instaló durante más de 10 años. Cerca de 3 años después de la operación con láser, se identificó una masa abultada en el lado lingual de las áreas #43 y #44. Se realizó una biopsia incisional y se diagnosticó como SCC. Se realizaron más pruebas, incluyendo laboratorio, radiografía de tórax, ECG, MRI, contraste CT, PET-CT y ecografía de cuello. Se diagnosticó al paciente con cT4aN2cM0 estadio IVA de acuerdo con el sistema de estadificación TNM propuesto por el American Joint Committee on Cancer (AJCC, 2018). Se programó inmediatamente una operación que incluía disección selectiva de cuello, resección de masa con mandibulectomía marginal y reconstrucción con un colgajo radial del antebrazo. El informe patológico final fue carcinoma de células escamosas bien diferenciado, con un tamaño de tumor de 1,5 × 2,0 cm, sin metástasis en ninguno de los 27 ganglios linfáticos regionales y margen de resección quirúrgica claro. No se observaron invasiones vasculares ni perineurales; por lo tanto, se diagnosticó como pT1N0M0, estadio I. Especialmente, en lugar de la interfaz entre el implante y el hueso, las células tumorales ocurrieron en la superficie del tejido blando mucoso primero y penetraron profundamente a lo largo de los hilos del implante. No se administró radioterapia adyuvante ni quimioterapia al paciente. Se encontró un ganglio linfático metastático en el nivel ipsilateral derecho IV en una tomografía computarizada de contraste realizada 4 meses después de la operación. Se realizó una disección selectiva del cuello, incluido el nivel IV derecho, y se encontró una lesión sospechosa de ser maligna en el maxilar derecho. La lesión del maxilar del paciente se confirmó como carcinoma de células escamosas mediante una biopsia incisional; por lo tanto, se le realizó una cirugía adicional 13 días después de la segunda disección selectiva del cuello. La sangre del paciente se recolectó antes de la operación, 10 días después de la operación y 3 meses después de la operación. Después de la precipitación a temperatura ambiente, las muestras se centrifugaron a 4000 rpm durante 20 minutos. Solo se recolectaron los sobrenadantes y se mezclaron con el tampón de lisis y se usaron para IP-HPLC. Aplicamos 100 µg de cada extracto de proteína al procedimiento de inmunoprecipitación utilizando una columna de agarosa con proteína A/G (Amicogen Co., Corea). Las columnas de agarosa con proteína A/G se preincubaron por separado con 1 µg de cada uno de los 20 antisueros diferentes, incluidos p53, muc1, muc4, TGF-B1, survivina, Wnt1, E-cadherina, β-catenina, metaloproteinasa de la matriz (MMP)-3, MMP-10, TNFα, HER1, HER2, PAI-1, NRAS, KRAS, CEA, Met, FASL y ERB. En resumen, las muestras de proteínas se mezclaron con 5 ml de tampón de unión (150 mM NaCl, 10 mM Tris pH 7,4, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 0,2 mM de vanadato de sodio, 0,2 mM PMSF y 0,5% NP-40) y se incubaron en las columnas de agarosa con proteína A/G a 10°C durante 1 hora. Las columnas se colocaron en un agitador rotatorio durante la incubación. Después de lavar cada columna con una cantidad suficiente de solución de PBS (pH 7,3, 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 43 mM Na2HPO4-7H2O y 1,4 mM KH2PO4), la proteína diana se eluyó con 150 µl de tampón de elución de IgG (Pierce Co., EE. UU.). Las proteínas inmunoprecipitadas se analizaron mediante HPLC (1100 series®, Agilent, EE. UU.) utilizando una columna de fase inversa y un sistema detector microanalítico (SG Hightech Co., Corea), que funcionaba con una solución de 0,15 M NaCl y 20% acetonitrilo durante 30 minutos y se analizó mediante espectroscopia UV a 280 nm. En los resultados de IP-HPLC, las áreas de los picos de proteínas de la muestra obtenidas del análisis de HPLC en el control negativo se usaron para eliminar el área del pico de anticuerpos (mAU*s) [–]. Para comparar las proteínas séricas preoperatorias y posoperatorias, se normalizaron proporcionalmente los valores de área de los picos de proteínas mediante el valor de a-tubulina y se representaron como una barra. Se prepararon extractos de proteínas a partir de tejido tumoral, 100 ug de cada extracto de proteína para el procedimiento de inmunoprecipitación utilizando una columna de agarosa de proteína A/G. Las columnas de agarosa de proteína A/G se preincubaron individualmente con 1 ug de cada uno de los 9 antisueros diferentes, incluidos TNFα, NRAS, HER2, Met, E-cadherina, p53, survivina, TGF-β1 y NFκB. En resumen, las muestras de proteínas se mezclaron con 5 ml de tampón de unión (NaCl 150 mM, Tris 10 mM pH 7,4, EDTA 1 mM, EGTA 1 mM, vanadato de sodio 0,2 mM, PMSF 0,2 mM y NP-40 al 0,5 %) y se incubaron en las columnas de agarosa de proteína A/G a 10 °C durante 1 h. Para comparar la proteína del tejido gingival normal y del SCC, los valores de área del pico de proteína se normalizaron proporcionalmente por el valor de a-tubulina y se representaron como una barra. Se recopilaron los resultados de laboratorio de rutina, incluidos los recuentos sanguíneos completos (CBC) con recuento diferencial, los niveles de proteína C reactiva (CRP) y la velocidad de sedimentación globular (ESR). Una elevación modesta en el CRP plasmático en el rango observado en individuos aparentemente sanos es un fuerte predictor de futuros eventos vasculares []. Chen et al. [] informaron que la presencia de un nivel elevado de CRP sérica preoperatoria (> 5.0 mg/L) es un indicador pronóstico independiente de cáncer oral. Los resultados de las pruebas de muestras de sangre se compararon desde la primera visita, preoperatoria, posoperatoria y en el momento de la recurrencia. Los análisis de IP-HPLC revelaron que p53, E-cadherina, β-catenina, MMP-10, HER2, NRAS, Met y ERb habían disminuido en el día 10 posoperatorio. Otros marcadores de proteínas relacionados con la señalización oncogénica habían aumentado en el día 10 posoperatorio. Esto sugiere que proteínas oncogénicas, tales como p53, E-cadherina, β-catenina, MMP-10, HER2, NRAS, Met y ERb se habían liberado del tumor primario; por lo tanto, los niveles séricos de estas proteínas oncogénicas disminuyeron después de la cirugía tumoral ablativa. Tres meses después de la operación, utilizando el suero del paciente, todos los marcadores de proteínas oncogénicas estaban elevados y se sospechó recurrencia o metástasis del tumor. Los análisis de IP-HPLC revelaron que NRAS, Met, p53 y NFκB estaban sobreexpresados en el tejido de SCC en la comparación de los niveles de proteínas oncogénicas entre la encía normal y el tejido de SCC, el recuento absoluto de neutrófilos (ANC), la VSG y la PCR, se elevaron inmediatamente después de la operación. La PCR no se realizó antes de la operación, por lo que esos datos no se pueden comparar con otros puntos temporales; no obstante, los niveles de PCR no habían cambiado significativamente antes y después de la segunda operación (disección selectiva del cuello derecho nivel IV, archivo adicional: figura S1). Cabe destacar que los recuentos de VSG se elevaron en el período preoperatorio, como se determinó cuando se confirmó una lesión maligna mediante biopsia incisional y se comparó con una muestra tomada en la primera visita. Eso indica que algunas reacciones inflamatorias pueden afectar el potencial de transformación maligna. Los cambios perioperativos en los glóbulos rojos, la hemoglobina y el hematocrito mostraron que los niveles disminuyeron durante el período posterior a la cirugía, pero tendieron a recuperarse con el tiempo (Archivo adicional: Figura S2). La proporción de neutrófilos segmentados aumentó inmediatamente después de la cirugía, que son células características de reacciones inflamatorias agudas, porque se dirigieron a la herida quirúrgica inmediatamente después del trauma en varios minutos. Las curvas graficadas de los niveles de linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos mostraron tendencias opuestas a los niveles de neutrófilos segmentados (Archivo adicional: Figura S3).