Ένας 9χρονος στειρωμένος αρσενικός γάτος παρουσιάστηκε τον Νοέμβριο του 2020 με ένα μήνα ιστορικό οίδημα μαλακών μορίων στη δεξιά πλευρά του προσώπου. Η βλάβη είχε φλεγμονώδη επιφάνεια και παρήγαγε λευκό έκκριμα όταν εγχειρίστηκε με βελόνα. Ο γάτος υποβλήθηκε σε θεραπεία με αντιβιοτικό (αμοξικιλλίνη, 20 mg/kg, BID, για 8 ημέρες) και κορτικοστεροειδή (από το στόμα, 0,3 mg/kg, BID, για 8 ημέρες). Τον Ιανουάριο του 2021, η γάτα μεταφέρθηκε ξανά στο νοσοκομείο λόγω του αυξημένου οιδήματος της βλάβης (Εικ. Α). Η βλάβη αφαιρέθηκε χειρουργικά υπό γενική αναισθησία (Εικ. Β). Η πλήρης εκτομή της μάζας ήταν δύσκολη λόγω της περιορισμένης διαθεσιμότητας του δέρματος και ένα τμήμα της βλάβης παρέμεινε στη γύρω περιοχή. Παρατηρήθηκαν λευκές ξένες δομές στις επιφάνειες του εκτομημένου ιστού (Εικ. Γ). Η ιστοπαθολογική εξέταση αποκάλυψε πολλαπλές ενότητες σκουληκιών, οδηγώντας στη διάγνωση ελμινθικής μόλυνσης. Στη γάτα χορηγήθηκε το επίκαιρο διάλυμα Broadline® (Merial, Ιαπωνία), ένα συνδυαστικό προϊόν που περιλαμβάνει πραζικουαντέλη, επρινομεκτίνη, φιπρονίλη, (S)-μεθοπρένη τέσσερις φορές το μήνα. Ωστόσο, η γάτα συνέχισε να ξύνεται το πρόσωπο της. Της τοποθετήθηκε ελισαβετιανό κολάρο και χορηγήθηκαν κορτικοστεροειδή (1 mg/kg, SID, 4 ημέρες, ακολουθούμενα από 0,6 mg/kg, SID, για 6 ημέρες). Τον Απρίλιο του 2021, οι βλάβες του δέρματος επανεμφανίστηκαν και έγιναν κνησμώδεις. Χορηγήθηκαν κορτικοστεροειδή (1 mg/kg, SID, PO) για 1 έτος, απαραίτητα για την ανακούφιση του κνησμού. Τον Ιανουάριο του 2022, οι βλάβες είχαν εξαπλωθεί περαιτέρω (Εικόνα Δ). Οι ιστοί βιοψίας από τις βλάβες του δέρματος (Εικόνες Ε και ΣΤ) στερεώθηκαν σε 10% ουδέτερο ρυθμιστικό φορμαλίνη και μεταποιήθηκαν σε μπλοκ παραφίνης χρησιμοποιώντας τις συνήθεις διαδικασίες. Τα ενθέματα παραφίνης κόπηκαν σε τμήματα 5 μm και χρωματίστηκαν με χρωστική αιμοξυλίνη και εωσίνη. Η μικροσκοπική παρατήρηση έδειξε πολυάριθμα τμήματα σκουληκιών διαφόρων μεγεθών και σχημάτων στον υποδόριο ιστό, που επεκτείνονταν στους ενδοδερματικούς μύες και στο δέρμα ακριβώς κάτω από την επιδερμίδα (Εικόνα Α). Τα σκουλήκια περιβαλλόταν από μακροφάγα, ουδετερόφιλα, λεμφοκύτταρα και κύτταρα πλάσματος, με αποτέλεσμα κοκκιωματώδη φλεγμονή. Τα σκουλήκια αυτά χαρακτηρίστηκαν ως άκεφα χωρίς ρόστελο και ρουθούνια, με μικροτριχίδια στο περίβλημα, με παρανέμιο με πολυάριθμα ασβεστοποιημένα σώματα, διευρυμένους εκκριτικούς πόρους μέσα σε ένα χαλαρό στρώμα, διμερή συμμετρία και ακανόνιστα αναπτυγμένους μύες (Εικόνα Β). Με βάση αυτά, τα σκουλήκια αναγνωρίστηκαν ως πολλαπλασιαστικά σπαράγγια του S. proliferum. DNA ελήφθη από δύο τμήματα με μορφήλίνη, ενσωματωμένα σε παραφίνη, χρησιμοποιώντας το κιτ προετοιμασίας DNA FFPE GeneRead (Qiagen) σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. Συνολικά ελήφθησαν 420 και 1.460 ng DNA από τα δύο τμήματα με αναλογίες A260/A280 (αποκτάμβιση σε 260 nm και 280 nm) 1,92 και 1,86 αντίστοιχα. Δημιουργήθηκε βιβλιοθήκη αλληλούχισης Illumina από κάθε ληφθέν δείγμα DNA (100 ng) χρησιμοποιώντας το κιτ προετοιμασίας Illumina DNA Library Prep (Illumina) σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. Οι βιβλιοθήκες αυτές αλληλουχίστηκαν στο MiSeq χρησιμοποιώντας το κιτ αντιδραστηρίων MiSeq v3 που παρήγαγε 300 bp διαβάσματα με διπλό άκρο. Τα προκύπτοντα ακατέργαστα δεδομένα αλληλούχισης 4,2 και 3,9 Gbp κατατέθηκαν στο DDBJ BioProject αριθ. PRJDB16823. Η μεταγονιδιωματική κατηγοριοποίηση των συνολικών δεδομένων έγινε με τη χρήση του CCMetagen []. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι ~ 47% των δεδομένων ήταν από Cestoda, ~ 38% από Mammalia (κυρίως Felis) και ~ 17% από Drosophila. Περίπου το 20% των δεδομένων από τα Cestoda κατηγοριοποιήθηκαν σε επίπεδο γένους (Spirometra). Για την ταυτοποίηση των ειδών, λάβαμε μιτοχονδριακές αναγνώσεις από το μεταγονιδιωματικό σύνολο δεδομένων και κατασκευάσαμε μιτοχονδριακά γονιδιώματα χρησιμοποιώντας τη ροή εργασίας GetOrganelle [ ] Οι βιβλιοθήκες αυτές αλληλουχίστηκαν στο MiSeq χρησιμοποιώντας το κιτ αντιδραστηρίων MiSeq v3 που παρήγαγε 300 bp διαβάσματα με διπλό άκρο. Το κυκλικό μιτοχονδριακό γονιδίωμα είχε μήκος 13.643 bp και έδειξε μεγάλη ομοιότητα (87–99%) με τις μιτοχονδριακές αλληλουχίες του Spirometra spp. Δημιουργήθηκε δέντρο μέγιστης πιθανότητας χρησιμοποιώντας το γονίδιο της υπομονάδας Ι της οξειδάσης του κυτοχρώματος (1.566 bp) των μιτοχονδρίων με 71 αλληλουχίες που κατατέθηκαν ως γονίδιο της υπομονάδας Ι της οξειδάσης του κυτοχρώματος του Spirometra spp. στο αποθετήριο αλληλουχιών Το δέντρο έδειξε έξι καλά καθορισμένες ομάδες που αντιστοιχούν σε ξεχωριστά είδη με σαφές γεωγραφικό μοτίβο όπως περιγράφεται από τους Kuchta et al. [ ] Η αλληλουχία μιτοχονδρίων που ελήφθη σε αυτή τη μελέτη τοποθετήθηκε στη μέση του συμπλέγματος S. mansoni με 100% ταυτότητα με αυτήν από την Κίνα (αριθμός καταχώρησης KY114886). Τα αποτελέσματα της εξέτασης παρουσιάστηκαν στον ιδιοκτήτη με την ανάγκη για επιπρόσθετη χειρουργική επέμβαση· ωστόσο, ο ιδιοκτήτης αρνήθηκε. Η γάτα μεταφέρθηκε πίσω στο νοσοκομείο στις 16 Απριλίου 2022. Η βλάβη στη δεξιά πλευρά εκτεινόταν από κάτω από το μάτι έως τη μύτη και το μάγουλο και εξαπλώθηκε περαιτέρω στην εσωτερική γωνία του δεξιού οφθαλμού (Εικ. G). Όταν η βλάβη τέθηκε υπό τομή, παρατηρήθηκαν πολυάριθμα κινητά, λευκά, αδενικά και ακανόνιστα σχήματα στο υποδόριο ιστό και στην επιφάνεια του δέρματος. Η βλάβη τέθηκε υπό τομή και χειρουργική επέμβαση με δερματικό κρημνό εκτελέστηκε στο κρανίο (Εικ. H). Ενδοεγχειρητικά, χορηγήθηκε πενταπλάσια αραίωση πραζικουαντέλης στο φυσιολογικό υποδόριο ιστό μετά την αφαίρεση της βλάβης για αρκετά λεπτά. Στις 30 Απριλίου 2022, αφαιρέθηκαν τα ράμματα (Εικ. I). Χορηγήθηκε υποδόρια πραζικουαντέλη (0,5 ml/kg) στην ωμοπλάτη, με δύο δόσεις που χορηγήθηκαν στις 30 Απριλίου 2022 και 2 μήνες αργότερα. Από τον Οκτώβριο του 2023, δεν υπήρξε επανεμφάνιση της βλάβης στο χειρουργικό σημείο.