Ο ασθενής (Εικ. ) ήταν ένα 5χρονο αγόρι από την Κίνα που εισήχθη στο νοσοκομείο με κύριο παράπονο διαταραχές άρθρωσης λόγου για 1,5 χρόνια, ασυντόνιστες κινήσεις για μισό χρόνο και επαναλαμβανόμενα επεισόδια κρίσεων για μία εβδομάδα. Παρατηρήθηκε τραύλισμα χωρίς προφανείς αιτίες ενάμιση χρόνο πριν και είχε σταδιακά αναπτύξει ασαφή άρθρωση, αδέξια ομιλία και αργή αντίδραση. Μέσα στους προηγούμενους 6 μήνες, άρχισε να έχει ασυντόνιστες κινήσεις, όπως αταξία και ασταθή βάδισμα. Τρία επεισόδια γενικευμένων τονικο-κλονικών κρίσεων συνέβησαν την εβδομάδα ακριβώς πριν από την επίσκεψη στην κλινική. Κάθε επεισόδιο διαρκούσε περίπου 1 λεπτό και συνέβη περίπου μία φορά κάθε 2 ημέρες. Έκανε τα κατάλληλα αναπτυξιακά βήματα πριν από την ηλικία των 3,5 ετών και γεννήθηκε με φυσιολογική γέννα από τον κόλπο χωρίς επιπλοκές. Δεν υπήρχε έκθεση σε αλκοόλ ή φάρμακα κατά την εγκυμοσύνη και οι βαθμολογίες Apgar ήταν 10 και 10 στα 1 και 5 λεπτά αντίστοιχα. Οι γονείς του δεν είχαν γνωστή συγγένεια και τόσο αυτοί όσο και η μεγαλύτερη αδελφή του ήταν υγιείς. Κατά την κλινική εξέταση, το μήκος, το βάρος και η περιφέρεια του κρανίου ήταν φυσιολογικά για την ηλικία του, και ήταν συνειδητός και εμφάνιζε φυσιολογική μυϊκή δύναμη και μυϊκό τόνο. Το αντανακλαστικό της επιγονατίδας και το αντανακλαστικό του Αχιλλείου τένοντα ήταν φυσιολογικά, και τα σημεία του Μπάμπιγκαν ήταν αρνητικά. Ήταν άναρθρος και απαντούσε στις ερωτήσεις αργά. Δεν μπορούσε να ολοκληρώσει τη δοκιμή εναλλαγής χεριών, τη δοκιμή φτέρνας-γόνατου-μηριαίας και τη δοκιμή δάχτυλο-μύτη λόγω κακής συνεργασίας με τις οδηγίες. Η τιμή του δείκτη νοημοσύνης, που μετρήθηκε με το συνδυασμό του τεστ του Ράβεν, ήταν 80 (μέσο επίπεδο). Οι εξετάσεις για το γαλακτικό οξύ του αίματος, την ομοκυστεΐνη, την αμμωνία, την κεραυλοπλασμίνη και τη λειτουργία του ήπατος και των νεφρών ήταν φυσιολογικές. Οι εξετάσεις για αντισώματα για αυτοάνοση εγκεφαλίτιδα στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό και στο αίμα ήταν αρνητικές. Ο έλεγχος για γενετικές μεταβολικές ασθένειες στο αίμα και τα ούρα δεν έδειξε προφανείς ανωμαλίες. Ένα ηλεκτροεγκεφαλογράφημα (EEG) έδειξε πολλαπλές αιχμές και βραδείς κυματισμούς αμφίπλευρα. Μια μαγνητική τομογραφία του εγκεφάλου έδειξε υψηλές υπερεντάσεις δίπλα στα αμφίπλευρα οπίσθια κέρατα των πλευρικών κοιλιακών σε εικόνες με βαρύτητα T2 και διευρύνσεις των παρεγκεφαλιδικών σχισμών (Εικ. Με γραπτή συγκατάθεση από τους γονείς του, ελήφθησαν δείγματα περιφερικού αίματος από τον ασθενή και τους γονείς του. Το DNA ελήφθη με τη χρήση του κιτ εκχύλισης Puregene (Qiagen, ΗΠΑ). Ο αναλυτής NextSeq500 (Illumina Inc., ΗΠΑ) χρησιμοποιήθηκε για την εξέταση των εξωνίων στα γονίδια που σχετίζονται με τις κληρονομικές λευκοεγκεφαλαιπάθειες. Τα γονίδια του πάνελ παρατίθενται στο πρόσθετο αρχείο. Τα δεδομένα που ελήφθησαν αναλύθηκαν με τη χρήση συνοδευτικού λογισμικού και οι μεταλλάξεις ονομάστηκαν σύμφωνα με το πρωτόκολλο. Οι μεταλλάξεις ερμηνεύτηκαν σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές από το Αμερικανικό Κολλέγιο Ιατρικής Γενετικής και Γονιδιωματικής και τον φαινότυπο του ασθενούς. [] Η άμεση αλληλούχιση επικύρωσε τις ανιχνευθείσες μεταλλάξεις. Η άμεση αλληλούχιση έγινε σε δείγματα από τον ασθενή και τους γονείς του με χρήση του αναλυτή ABI3500 (Life Technology, ΗΠΑ) και τα δείγματα υποβλήθηκαν σε ανάλυση αλληλουχίας με χρήση του αναλυτή Sequence Scanner v1.0 (Applied Biosystems, ΗΠΑ). Οι αντιστοιχίες με τους κινέζους μάρτυρες ελήφθησαν από το Shenyang Kingmed for Clinical Laboratory (Shenyang, Κίνα). Η διαδικασία αλληλούχισης και επικύρωσης μεταλλάξεων έγινε από το Shenyang Kingmed for Clinical Laboratory (Shenyang, Κίνα), το οποίο παρέχει υπηρεσίες επιθεώρησης από τρίτους. Οι πιθανές επιπτώσεις των μεταλλάξεων στη λειτουργία των πρωτεϊνών αναλύθηκαν με τη χρήση του εργαλείου πρόβλεψης Polymorphism Phenotyping v2 (PolyPhen-2) (), SIFT () και MutationTaster (). Η γενετική ανάλυση έδειξε ότι ο ασθενής είχε μια ομόζυγη μεταλλαγή σημείου c.892G > A (p.Glu298Lys) (αναφορά ακολουθίας: NM_017882.2) στο εξόνιο 7 του CLN6 και ότι και οι δύο γονείς του ήταν ετερόζυγοι για τη μεταλλαγή (Εικ.). Η μεταλλαγή δεν ανιχνεύθηκε σε 259 άτομα ελέγχου. Διαγνώστηκε η LINCL και έγινε οπτική εξέταση η οποία δεν έδειξε εμφανείς ανωμαλίες. Οι αναλύσεις PolyPhen-2, SIFT και MutationTaster υποδεικνύουν ότι η μεταλλαγή θα επηρρεάσει αρνητικά τη λειτουργία της πρωτεΐνης (Πίνακας). Η μεταλλαγή στον ασθενή είναι η πρώτη που αναφέρθηκε και μπορούμε να την ορίσουμε ως υπολειπόμενη. Λόγω του ιστορικού των κρίσεων και των αποτελεσμάτων του EEG, η ασθενής διαγνώστηκε με επιληψία και της χορηγήθηκε από του στόματος βαλπροϊκό νάτριο (VPA). Η χορήγηση του VPA ξεκίνησε με 15 mg/kg ημερησίως, χορηγούμενο σε δύο δόσεις, αυξάνοντας σε περίπου 25 mg/kg ημερησίως σε 2 εβδομάδες. Το εύρος της συγκέντρωσης στο αίμα ήταν 56-78 μg/ml σε διάστημα 6 μηνών. Κατά την παρακολούθηση των 6 μηνών, τα επεισόδια μειώθηκαν σε περίπου μία φορά το μήνα, οι διαταραχές άρθρωσης και οι ασυντόνιστες κινήσεις παρέμειναν και η απώλεια όρασης δεν ανιχνεύθηκε. Στο σημείο του CLN6, αναλύθηκαν 31 μεταλλάξεις συμπεριλαμβανομένων των αναφερόμενων και των δικών μας· 22,6% (7/31) εντοπίστηκαν στις κυτταροπλασματικές περιοχές, 32,2% (10/31) στις περιοχές TM και 45,2% (14/31) στις φωτεινές περιοχές της πρωτεΐνης. Όσον αφορά κάθε περιοχή της πρωτεΐνης, οι μεταλλάξεις εντοπίστηκαν κυρίως στο βρόχο TM3-TM4 (6/31), στον βρόχο TM1-TM2 (4/31) και στο άκρο C (4/31), ενώ δεν αναφέρθηκαν μεταλλάξεις στον βρόχο TM4-TM5, στον βρόχο TM5-TM6 και στον τομέα TM7 (Πίνακας).