Ein 78-jähriger Mann wurde wegen zunehmender Müdigkeit und Bauchschmerzen in die Hämatologie des Universitätsklinikums Sant’Andrea-Sapienza eingewiesen. Vom Patienten wurde eine schriftliche Einverständniserklärung eingeholt, und die Studie wurde von unserem institutionellen Prüfungsausschuss genehmigt. Das periphere Blutbild zeigte Hyperleukozytose (WBC 118 × 109/l), Anämie (Hämoglobin 8,6 g/dl) und leichte Thrombozytopenie (98 × 109/l), ohne assoziierte Splenomegalie. Das periphere Blutbild zeigte Hyperzellularität mit 90 % Blastzellen. Die morphologische Untersuchung von Knochenmarksaspiraten ergab 90 % agranulare Blastzellen mittlerer und großer Größe und die immunphänotypische Analyse, die mit einem FACScalibur-Durchflusszytometer nach dem Standardprotokoll durchgeführt wurde, ergab, dass die Blastzellen CD34+, CD117+, CD33+, CD13+, HLA-DR+, CD2+ MPO+/−, CD7+/− waren. Eine Diagnose von AML (M2) wurde gestellt und der Patient begann mit einer Zytoreduktion mit Hydroxyurea. Nach sieben Tagen der Behandlung erreichte der WBC-Wert 39 × 109/L. Das konventionelle Karyotypieren wurde nach kurzfristiger Kultivierung auf dem BM-Diagnosespatel durchgeführt und nach G-Banding analysiert. Die Beschreibung des Karyotyps erfolgte gemäß dem International System for Human Cytogenetic Nomenclature. Die zytogenetische Analyse auf G-bandierten Metaphasen ergab einen 46,XY,t(9;22)(q34;q11) Karyotyp. Dann wurden Interphase-FISH-Experimente mit BCR-ABL1-Sonden (Vysis) durchgeführt und die Anwesenheit des BCR-ABL1-Fusionsgens nachgewiesen. Nach der Lösung einer pulmonalen Aspergillus-Infektion, die mit Voriconazol behandelt wurde, begann der Patient mit einer Behandlung mit 5-aza-2'-desoxycytidin (auch Decitabin genannt, 20 mg/m2 für 5 Tage) für insgesamt zwei Zyklen. Anschließend ergab die nested RT-PCR die gleichzeitige Anwesenheit der gemeinsamen p190 e1a2- und der seltenen e6a2-Isoformen. PCR-Produkte, die der BCR-ABL1-p190-Amplifikation entsprachen, wurden aus Agarosegelen (QIAquick PCR Purification Kit - Qiagen) gereinigt und direkt auf dem ABI/Prism 3130 Sequenzer (Thermo Fisher Scientific) mit dem Forward-Primer Q-BCR_ex6_F (GATCCAACGACCAAGAACTCTCT), dem Reverse-Primer ENR561 und der ENP541-Sonde, die an anderer Stelle beschrieben wurde [], aufgereinigt. Die p190 e6a2-Werte wurden auf die Anzahl der ABL1-Transkripte normalisiert und als Anzahl der p190 e6a2-Kopien pro 104 Kopien von ABL1 ausgedrückt. Um die molekulare Reaktion nach der Behandlung zu bewerten, wurde ein quantitativer Real-Time-RT-PCR-Assay (RQ-PCR) für p190 e6a2 entwickelt, mit dem wir eine deutlich unterschiedliche Kinetik der e1a2- und e6a2-Transkripte mit konsistenter Persistenz von e6a2 feststellen konnten []. Nach dem ersten Zyklus zeigte BM aspirate 70% Blastzellen und zwei Transkripte e1a2 und e6a2 waren jeweils 3,09 und 5805,47/104 ABL1, während nach dem zweiten Zyklus Blastzellen 20% und e1a2 und e6a2 5,71 und 5747,52 waren. Aufgrund der anhaltenden pancytopenie und der Anwesenheit von Blasten nach zwei Zyklen mit Decitabin und angesichts der molekularen Daten wurde der Patient dann auf eine TKI-Behandlung umgestellt. Die initiale Therapie bestand aus 600 mg/Tag Imatinib über zwei Wochen, die anschließend aufgrund einer febrilen Neutropenie auf 400 mg/Tag reduziert wurde. Nach einem Monat mit Imatinib zeigte sich, dass das Knochenmark zu 60 % aus Blastenzellen bestand, wobei sich die Thrombozytopenie nur geringfügig verbesserte. Daher wurde die Behandlung auf 100 mg/Tag Dasatinib umgestellt, die jedoch fünf Tage später aufgrund einer Lungenembolie abgebrochen wurde. Zehn Tage nach Absetzen der TKI-Therapie lag der e1a2- und e6a2-Wert bei 0,17 bzw. 9477,16/104 ABL1. Nach zwei Monaten kontinuierlicher TKI-Therapie waren Knochenmarkinfiltrationen vorhanden, und die beiden Transkripte e1a2 1,6 und e6a2 23727,06/104 ABL1 waren erhöht (Abb. ). Der Patient, der immer noch nicht auf die Zweitlinienbehandlung ansprach, starb an einer Lungeninfektion.