En 5 uger gammel, helt hvid, krydset husky-hvalp blev bragt til University of Saskatchewans veterinærmedicinske center (VMC) med en en-dags historie med unormal neurologisk adfærd, der inkluderede cirkulation, ataxi, vokalisering og sløvhed. Hvalpen havde en uhensigtsmæssig mentalitet ved fremvisningen, der var ingen trussel bilateralt, normal pupil-lysrespons blev noteret, gag-refleks var til stede og ingen andre kranienerve-underskud blev noteret. Hvalpen gik i cirkulation til venstre og havde en ataxi-gangart. Der var ingen andre signifikante neurologiske fund. Neuroanatomisk lokalisering tydede på multifokale centrale nervesystem-læsioner i forebrain og hjernestamme. Det lokale dyreværn havde modtaget tæven og hendes 8 hvalpe fra Northern Saskatchewan; moderen blev vaccineret ved ankomsten til internatet. Hvalpene blev efterfølgende vaccineret syv dage senere med en modificeret levende vaccine (Nobivac 1 DAPPC, Merck Animal Health) efter at alle hvalpe havde testet negative for hundeparvovirus med en enzym-linked immunosorbent assay (SNAP Parvo test, IDEXX Laboratories, Markham, ON). Alle de andre hvalpe og moderen var asymptomatiske med undtagelse af en hvalp, der blev indlagt på VMC en dag før den hvalp, der er beskrevet her, med en 3-dages historie med sløvhed, øget respirationsindsats og bilateral serøs næseflåd. En infektion i de øvre luftveje blev mistænkt. Amoxicillin (Apotex Inc.; Toronto; ON) 22 mg/kg PO q12 i 10 dage blev ordineret, og hvalpen blev udskrevet med instruktioner om straks at blive fravænnet fra moderen og isoleret fra de andre hvalpe. Der blev ikke noteret neurologiske abnormiteter i denne eller i nogen af de andre hvalpe på noget tidspunkt. Denne hvalp blev isoleret ved ankomsten på grund af mistanke om en underliggende smitsom sygdom, herunder mulig hundegalskab. Der blev opnået samtykke fra det lokale dyreværn til at udføre diagnostik og give understøttende behandling. Normosol R (Hospira, Montreal, QC) blev givet intravenøst med 4 ml/kg/t. og der blev givet analgesi med hydromorphon (Sandoz Inc., Boucherville, QC) 0,05 mg/kg IV q4. En nødsituationspanel afslørede et pakket cellevolumen på 22 % (26,5–35,5), total protein på 5,8 g/dl (3,7–4,8), Azottick® (Siemens Healthcare Diagnostics Inc., Tarrytown, NY) blod urea nitrogen på 5-15 mg/dl (13,1–46,2) og blodglukose på 10,3 mmol/l (6,7–8,9). Et komplet blodtal blev også indsendt til Prairie Diagnostic Services Inc. (PDS), som afslørede en moderat regenerativ anæmi; røde blodcelleantal (RBC) 3,25 × 1012/L (5,8–8,5) og hæmatokrit (HCT) 0,22 L/L (0,39–0,56). En moderat venstresidig forskydning med toksiske ændringer, der indikerer akut inflammation, blev også noteret; hvide blodcelleantal (WBC) 10,7 × 109/L (4,9–15,4), segmenterede neutrofiler 8,0 × 109/L (3,0–10,0) og bånd 1,0 × 109/L (0,0–0,1). Blodprøveresultaterne inkluderede aldersspecifikke referenceområder, der var relevante for denne patient []. Indledende differentialdiagnoser for de neurologiske tegn inkluderede hunde-distemper, bakteriel meningitis, protozoal meningitis (f.eks. toxoplasmose) og mindre sandsynligt en mulig usædvanlig manifestation af rabies. Symptomatisk behandling med bredspektrede antibiotika blev indledt og inkluderede Metronidazole (Baxter, Mississauga, ON) 25 mg/kg IV q12, Piperacillin (SteriMax Inc., Oakville, ON) 40 mg/kg IV langsomt over 30 min q6 og hensigten om at administrere Clindamycin (Intervet, Kirkland, QC) 12,5 mg/kg PO q12. Clindamycin kunne ikke administreres, da hvalpen hurtigt mistede sin gagrefleks, da dens mentale tilstand gradvist forværredes inden for de første 4 timer efter præsentationen. Hvalpen mistede og genvandt bevidstheden hvert minut og blev ikke-reagerende på eksterne stimuli. Efter yderligere diskussion med det lokale dyreværn blev det besluttet af velfærdsmæssige grunde og en mistænkt dårlig prognose at aflive hvalpen. Hvalpen blev aflivet med intravenøs Pentobarbital (Bimeda-MTC, Cambridge, ON) 2 ml/4,5 kg; døden blev bekræftet ved hjertelyd. Der var ikke behov for yderligere anæstetiske midler på grund af hvalpens sløvhed. Hvalpen blev aflivet 18 timer efter de første kliniske tegn blev observeret. En obduktion blev udført den følgende dag på Prairie Diagnostic Services (PDS) i Saskatoon, Saskatchewan. Hvalpen var i god fysisk stand. De vigtigste fund var ødematøse, plettet lyserøde til blegrøde lunger og en diffus forstørret, bleg brun lever. Der blev ikke konstateret nogen ødemer i galdeblæren. Histopatologi blev udført på større organer, herunder hjerne (cerebrum, thalamus, cerebellum, pons, medulla), lunger, hjerte, lever, milt, øjne, knoglemarv, nyrer, lymfeknuder og tyndtarme. Områder med hypercellularitet i hjernen centreret omkring kar og ledsaget af akut blødning blev observeret, især i corona radiata, caudate nucleus, thalamus, pons og leptomeninges. Kar var omgivet og infiltreret af makrofager, og dette var forbundet med ødem, små mængder fibrin, nekrotiske inflammatoriske celler og blødning i Virchow-Robbin-rummet og den tilstødende neuropil. Et par makrofager viste erythrophagia. Endothelceller var hypertrofierede og indeholdt ofte en stor basofil intranukleær indeslutningslegeme. Hepatocytter var diffus, mild vakuoliseret, og der var sjælden individuel nekrose af celler. Hepatocytkerner indeholdt også ofte store basofile indeslutningslegemer. Lungealveolerne var fyldt med ødemvæske, en lille mængde fibrin, røde blodlegemer, og alveolvæggene var multifokalt infiltreret af makrofager. Sjældent indeholdt endothelceller i interalveolære kapillærer intranukleære indeslutningslegemer. Endothelceller, der indeholdt disse intranukleære indeslutningslegemer, blev også almindeligt observeret i kar i flere organer, herunder i nyrer, knoglemarv, lymfeknuder, lever og nethinde. Tegn på vaskulær skade og blødning var varierende. De vigtigste endelige histologiske diagnoser var meningoencephalitis med vasculitis og hepatisk nekrose, der mistænktes at være fra en virusinfektion på grund af tilstedeværelsen af de intranukleære indeslutningslegemer. De ætiologiske differentialdiagnoser var Canid Alphaherpesvirus 1 (CaHV-1), Canine Adenovirus type 1 (CAdV) og hundehvalpefeber (CDV). Da hvalpen var ældre end 3 uger, blev hundeherpesvirusinfektion anset for mindre sandsynlig. Immunhistokemi for adenovirus, CDV og rabies blev udført på hjernevæv. Resultaterne var positive for adenovirus og negative for CDV og rabies. CDV blev dog påvist ved reverse transcription PCR (IDEXX Laboratories) i en prøve af helblod indsamlet før eutanasi. Immunhistokemisk farvning for både CAdV og CDV blev udført på hjernevæv ved PDS på en automatiseret farvningsplatform (Autostainer Plus, Dako Canada Inc., Mississauga, ON). Der blev udført varm-induceret epitop-hentning, og de primære antistoffer (geder anti-CAdV, Virostat, Portland, ME og mus anti-CDV (klon DV2-12), Custom Monoclonals International, West Sacramento, CA) blev anvendt i en fortynding på 1:4000. Et avidin/biotin-blokerende reagens (Vector Labs; Burlingame, CA) blev anvendt før CAdV-antistoffet. Binding af CAdV-antistoffet blev påvist ved hjælp af kanin anti-geder immunoglobuliner (Vector Labs; Burlingame, CA) og et avidin-biotin immunperoxidase kompleksreagens (Vector Labs; Burlingame, CA), og binding af CDV-antistoffet blev påvist ved hjælp af et HRP-mærket polymer detektionsreagens (EnVision+ System - HRP Labelled Polymer, Dako Canada Inc., Mississauga, ON). Farvningen blev visualiseret ved hjælp af 3,3′-diaminobenzidintetrahydroklorid (DAB) (Dako Canada Inc., Mississauga, ON) som kromofor. CDV-antigener blev ikke påvist. Der blev dog observeret adskillige celler med stærk cytoplasmisk og nuklear farvning for CAdV-antigener inden for endothelcellerne, hvilket bekræftede infektiøs hundehepatitis Yderligere immunhistokemisk farvning blev også udført på University of Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory for at udføre specifik farvning for at differentiere mellem CAdV-1 og CAdV-2. Resultaterne viste, at få endothelceller havde positiv immunreaktivitet for CAdV-1. IHC-farvning for CAdV-2 var negativ. Efterfølgende afslørede affaldet, at ingen af de 7 andre hvalpe udviklede neurologiske tegn, og hvalpen med respiratoriske tegn kom sig helt efter antibiotika. Moderen og hvalpene blev holdt til observation på dyreinternatet i 2 måneder, før de blev adopteret. Efterfølgende kontrol af alle hvalpe 5 måneder senere afslørede, at alle hvalpe havde det godt, og der var ingen aktuelle sundhedsproblemer.