En tidligere sund 61-årig mand besøgte en lokal læge med en hovedpine. Han blev henvist til neurokirurgisk afdeling på vores hospital på mistanke om en tumor i kraniet. Magnetisk resonansbilleddannelse af hovedet blev udført med en 3 T-enhed (GE DISCOVERY MR750; GE Healthcare) med gadoliniumbaseret kontrastmiddel, og der blev mistanke om en metastatisk tumor. Blodundersøgelsen viste et højt prostataspecifikt antigenniveau på 165,42 ng/mL, og en computertomografi-scanning opdagede lytiske læsioner af bækkenbenet ved siden af den unormalt forstørrede prostata.. 99mTc-hydroxymethylen-diphosphonat-knoglescintigrafi afslørede flere knoglemetastaser i hele kroppen. Patienten blev yderligere henvist til vores afdeling på mistanke om flere knoglemetastaser fra prostatacancer. En nålbiopsi af patientens prostata afslørede et adenocarcinom med en Gleason-score på 5 + 4 = 9, hvilket medførte ADT. Forhøjelse af niveauet af prostataspecifikt antigen og postrenal svigt på grund af urinretention blev observeret 1 år efter, at ADT startede, og kanal-transuretral resektion af prostata (TURP) blev således udført. Docetaxel blev administreret i alt syv gange, fordi patientens tumor blev anset for at have erhvervet kastrationsresistens. Imidlertid blev flere lymfeknuder og knoglemetastaser forværret. Selvom i alt seks kurser af cabazitaxel allerede var blevet administreret, blev det afbrudt på grund af infektion i sacral tryksår og forværring af patientens generelle tilstand. Han blev efterfølgende behandlet med abirateron, men han døde 2 år og 6 måneder efter at være blevet diagnosticeret med prostatacancer ved hjælp af prøver indsamlet ved TURP. RB1 og BRCA2 co-deletion samt en trunkerende mutation af TP53 (G244Rfs*19) blev opdaget. Amplifikation af androgen receptor (AR) genet blev observeret med et estimeret antal kopier på 18,3. Derudover blev en patched 1 (PTCH1) punktmutation (p.R441H) opdaget som en muligvis patogen ændring. Immunohistokemisk farvning blev udført ved hjælp af standardprotokoller. Produkterne af antistofferne og de detaljerede protokoller vises i den supplerende fil. Alle farvede sektioner blev scannet ved hjælp af en digital diasskanner med høj opløsning (NanoZoomer-XR C12000; Hamamatsu Photonics, Hamamatsu, Shizuoka, Japan), som bestod af et trilineært sensorkamera, en detektor med 4096 pixels × 64 linjer × 3 plader og et filter, der kun opdeler i RGB med et prisme. Den målte opløsning af alle mikroskopi-billeder var 0,23 μm/pixel, hvilket var ækvivalent med 40 × objektivlinse. Hematoxylin- og eosinfarvning viste, at tumorceller havde klare nukleoli og en histologi, der var forskellig fra den for typiske neuroendokrine prostatacancerceller. Fuldstændig mangel på RB1- og p53-proteinudtryk (Supplerende fil: fig. S1A-B) var i overensstemmelse med de genomiske fund. AR blev farvet i 70 % af tumornukleerne, og PSA var positiv i omkring 30 % af tumorcellerne (Supplerende fil: fig. S1C-D), mens neuroendokrine markører ikke blev farvet (Supplerende fil: fig. S1E-G). Immunohistokemisk farvning af glioma-associeret onkogen-familie zinkfinger 1 (GLI1) blev udført for at bekræfte, om hedgehog-signalet blev forstærket af en mutation af PTCH1 i vores tilfælde. GLI1-positive tumorceller udgjorde mindre end 10% af det samlede antal (Supplerende fil: Fig. S1H), og cellernes farbarhed i kernen var ikke stærkere end i Leydig-celler, der blev brugt som positiv kontrol (data ikke vist), hvilket indikerer, at hedgehog-signalet ikke blev forstærket.