17letá dívka byla doporučena na naši endokrinologickou kliniku kvůli hyperkeratotickým a pigmentovaným lézím na krku a celém těle, které se poprvé objevily, když jí byly 4 roky. Její výška byla během dětství (< 4 roky) v normálním rozmezí, ale postupně začala být pod normální růstovou křivkou, což nakonec vyústilo v dospělou krátkou postavu. Pacientka byla prvním dítětem čínského páru, který s ní nebyl příbuzný. Její matka porodila vaginálně po plném těhotenství. Dívka vážila při narození 4 kg a měřila 50 cm. Neměla žádné neurologické vady ani kosterní abnormality, žádný diabetes mellitus ani související příznaky a v rodinné anamnéze se nevyskytla žádná rakovina. Rodiče pacientky, její mladší sestra a bratr neměli žádnou významnou zdravotní anamnézu (obr. Při fyzickém vyšetření pacientka vykazovala rozsáhlé, sametové, silné, hyperpigmentované plaky postihující krk, záda a podpaží (obrázek). Pacientka byla nedysmorfická dívka s výškou 146 cm (<-2SD). Laboratorní testy neprokázaly žádné abnormální biochemické nálezy (tabulka). Hladiny hormonů štítné žlázy, kortizolu a androgenu byly v normálním rozmezí (hladina testosteronu uvedená v tabulce byla pod referenčním rozsahem, testovali jsme testosteron ještě jednou a druhá hodnota byla normální: 31,8 ng/dl). Hladina glukózy v krvi nalačno a hladina inzulinu nalačno byly 88,2 mg/dL a 13,78μU/ml. Index posouzení homeostázy pro rezistenci vůči inzulinu (HOMA-IR) jako výsledek inzulinu nalačno (mUI/ml) × glukóza (mmol/l) /22,5 byl 3,0. Tento výsledek neprokázal žádnou rezistenci vůči inzulinu. Tato zjištění vyloučila diagnózu rezistence vůči inzulinu, T2D, Cushingova syndromu a hyperandrogenismu. Rentgenové vyšetření (provedeno ve 14 letech) neodhalilo žádné abnormality (obr. V několika případech syndromického AN byly zjištěny genetické mutace, proto byla provedena mutační analýza u probandky a jejích rodičů. Probandka a její rodiče podepsali písemný informovaný souhlas. Sbírali jsme vzorky periferní krve (4 ml) probandky a jejích rodičů. Genomická DNA byla extrahována z krve pomocí QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen China Co., Ltd., Shanghai, Čína) podle doporučení výrobce. Nejdříve jsme provedli sekvenování celého exomu pro probandku. Dále jsme na základě výsledků testu sekvenování celého exomu potvrdili přítomnost mutace u probandky a jejích rodičů přímým Sangerovým sekvenováním postiženého exonu. Všechny kódovací exony byly obohaceny pomocí xGen Exome Research Panel v1.0 (Integrated DNA Technology, Inc). Zachycené knihovny DNA byly sekvenovány na Illumina Hiseq X Ten podle pokynů výrobce pro párované konce 150 bp. Varianty byly považovány za patogenní mutace, pokud vykazovaly následující součásti: i) vzácné nebo chybějící v uvedených genomových databázích; ii) očekávaná variace, která má drastický účinek na protein (nesmyslná mutace, posun rámce, mutace na místě splicingu nebo nesmyslová mutace je vysoce konzervovaná mezi druhy); a iii) očekávaná variace, která je škodlivá. Sangerovo sekvenování postiženého exonu ve FGFR3 bylo provedeno na vzorcích DNA od probandky a jejích rodičů. Podle DNA sekvence genu FGFR3 byly navrženy primery exonu 14 FGFR3 pomocí softwaru Primer Premier 5. Funkční účinky proteinových variant byly předpovězeny pomocí PolyPhen2 (O), SIFT () a Mutation Taster ()). Díky dolování dat, v kombinaci s genetickými vlastnostmi a klinickými projevy, jsme identifikovali heterozygotní c.1949A > C, p. Lys650Thr mutaci v FGFR3 proband, která je považována za patogenní mutaci. Vzhledem k tomu, že rodiče probanda tuto mutaci neměli, byla mutace identifikovaná u probanda de novo mutací. Potvrzení sekvenováním Sanger je znázorněno na obr.. Mutace způsobila změnu v proteinu z K na T v p. Lys650, který se nachází v exonu 14 FGFR3. Patogenita mutace na kosti a kůži byla dříve hlášena [–] a byla potvrzena pomocí 3 různých softwarových programů (očekávané skóre mutace z každého softwarového programu je znázorněno v doplňkovém souboru: Tabulka S1): SIFT (0), PolyPhen-2 (1) a Mutation taster (způsobující onemocnění).