Pruzený chlapec (obr. ) byl 5letý čínský chlapec, který byl přijat do nemocnice s hlavní stížností na poruchy artikulace řeči po dobu 1,5 roku, nekoordinované pohyby po dobu půl roku a opakované záchvaty po dobu jednoho týdne. Koktání bylo zaznamenáno bez zjevných příčin před rokem a půl a postupně se u něj vyvinulo nejasné vyjadřování, nemotorná řeč a pomalá odezva. V předchozích 6 měsících začal mít nekoordinované pohyby, jako je ataxie a nestabilní chůze. V týdnu bezprostředně před návštěvou kliniky se objevily tři epizody generalizovaných tonicko-klonických záchvatů; každá epizoda trvala asi 1 minutu a vyskytovala se přibližně jednou za dva dny. Před dosažením věku 3,5 roku dosáhl příslušných vývojových milníků a narodil se v termínu vaginálním porodem bez jakýchkoli komplikací. Během těhotenství nebyl vystaven alkoholu ani lékům a Apgar skóre bylo 10 a 10 v 1. a 5. minutě. Jeho rodiče nebyli příbuzní a oba i jeho starší sestra byli zdraví. Při fyzickém vyšetření byla délka, hmotnost a obvod hlavy normální pro daný věk, byl při vědomí a vykazoval normální svalovou sílu a svalový tonus. Patelární reflex a Achillův reflex byly normální a Babinského příznaky byly negativní. Byl nesrozumitelný a na otázky odpovídal pomalu. Nemohl dokončit test střídavého pohybu rukou, test pat-k-holení-tibia ani test prst-nos, protože špatně spolupracoval s pokyny. Hodnota IQ, měřená kombinovaným testem Raven, byla 80 (střední úroveň). Testy na kyselinu mléčnou v krvi, homocystein, amoniak, ceruloplasmin a funkci jater a ledvin byly normální. Testy na protilátky proti autoimunitní encefalitidě v mozkomíšním moku a krvi byly negativní. Screening na genetická metabolická onemocnění v krvi a moči neprojevil žádné zjevné abnormality. Elektroencefalogram (EEG) vykazoval mnoho spik a pomalé vlny bilaterálně. Skenování mozku MRI ukázalo vysokou hyperintenzitu přiléhající k bilaterálním zadním rohům laterálních ventrikulů na T2-vážených snímcích a rozšířené cerebelární fissury (obr. S písemným souhlasem rodičů probanda byly odebrány vzorky periferní krve od probanda a jeho rodičů. DNA byla extrahována pomocí extrakčního kitu Puregene (Qiagen, USA). Pro screening exonů v genech souvisejících s dědičnými leukoencefalopatiemi byl použit sekvenátor NextSeq500 (Illumina Inc., USA). Geny v panelu jsou uvedeny v doplňujícím souboru. Získaná data byla analyzována pomocí doprovodného softwaru a varianty byly pojmenovány podle protokolu. Varianty byly interpretovány podle pokynů Americké vysoké školy lékařské genetiky a genomiky a podle fenotypu pacienta []. Přímé sekvenování potvrdilo detekované mutace. Přímé sekvenování bylo provedeno na DNA probanda a jeho rodičů pomocí sekvenátoru ABI3500 (Life Technology, USA) a vzorky byly podrobeny sekvenční analýze pomocí Sequence Scanner v1.0 (Applied Biosystems, USA). Shodné čínské kontroly byly získány od klinické laboratoře Shenyang Kingmed (Shenyang, Čína). Postup sekvenace a ověření mutace provedla klinická laboratoř Shenyang Kingmed (Shenyang, Čína), která poskytuje služby kontroly třetí strany. Možné účinky mutací na funkci bílkovin byly analyzovány pomocí predikčního nástroje Polymorphism Phenotyping v2 (PolyPhen-2) (), SIFT () a MutationTaster (). Genetická analýza ukázala, že proband měl homozygotní missense bodovou mutaci c.892G > A (p.Glu298Lys) (referenční sekvence: NM_017882.2) v exonu 7 v CLN6 a že oba jeho rodiče byli heterozygotní pro tuto mutaci (obrázek). Mutace nebyla detekována u 259 kontrolních subjektů. LINCL byla diagnostikována a byl proveden vizuální test, který neprokázal žádné zjevné abnormality. Analýza pomocí PolyPhen-2, SIFT a MutationTaster naznačila, že by mutace mohla negativně ovlivnit funkci proteinu (tabulka). Mutace u pacienta je první, která byla hlášena, a můžeme ji definovat jako recesivní. Vzhledem k historii záchvatů a výsledkům EEG byl pacientovi diagnostikován epilepsie a bylo předepsáno perorální podávání sodné soli valproátu (VPA). Podávání VPA bylo zahájeno dávkou 15 mg/kg za den, podávanou ve dvou dávkách, která byla během 2 týdnů zvýšena na přibližně 25 mg/kg za den. Rozsah koncentrace v krvi byl 56–78 μg/ml během 6 měsíců. Při 6měsíčním sledování se záchvaty snížily na přibližně jednou měsíčně, poruchy artikulace a nekoordinované pohyby přetrvávaly a ztráta zraku nebyla zjištěna. V lokusu CLN6 bylo analyzováno 31 missense mutací včetně námi hlášených; 22,6 % (7/31) bylo lokalizováno v cytoplasmatických doménách, 32,2 % (10/31) v TM doménách a 45,2 % (14/31) v luminálních doménách proteinu. Pokud jde o každou doménu proteinu, mutace byly většinou lokalizovány v TM3-TM4 smyčce (6/31), TM1-TM2 smyčce (4/31) a C-terminu (4/31), a žádné mutace nebyly hlášeny v TM4-TM5 smyčce, TM5-TM6 smyčce a TM7 doméně (Tabulka).