Předchozí zdravý 61letý muž navštívil místního lékaře s hlavní stížností na masu na hlavě. Byl poslán na neurochirurgické oddělení naší nemocnice kvůli podezření na nádor v lebce. Magnetická rezonance hlavy byla provedena na 3T zařízení (GE DISCOVERY MR750; GE Healthcare) s kontrastní látkou na bázi gadolinia a bylo podezření na metastatický nádor (obr. A). Vyšetření krve ukázalo vysokou hladinu prostatického specifického antigenu 165,42 ng/ml a počítačová tomografie odhalila lytické léze pánevní kosti přiléhající k abnormálně zvětšené prostatě. (obr. B). Scintigrafie kostí pomocí 99mTc-hydroxyethylen-difosfonátu odhalila četné kostní metastázy po celém těle (obr. C). Pacient byl dále poslán na naše oddělení kvůli podezření na četné kostní metastázy z rakoviny prostaty. Biopsie jehly pacientovy prostaty odhalila adenokarcinom s Gleasonovým skóre 5 + 4 = 9, což vedlo k ADT. Rok po zahájení ADT bylo pozorováno zvýšení hladiny prostatického specifického antigenu a postrenální selhání způsobené zadržováním moči, a proto byla provedena kanálová transuretrální resekce prostaty (TURP). Docetaxel byl podáván celkem sedm cyklů, protože se předpokládalo, že pacientův nádor získal rezistenci vůči kastraci. Byly však zhoršeny četné metastázy v lymfatických uzlinách a v kostech. Přestože bylo podáno celkem šest cyklů kabazitaxelu, bylo jeho podávání přerušeno kvůli infekci v sakrální dekubitální ráně a zhoršení celkového stavu pacienta. Následně byl léčen abirateronem, ale zemřel 2 roky a 6 měsíců poté, co mu byla diagnostikována rakovina prostaty (obr. ). Provedli jsme genetické sekvenování 160 genů souvisejících s rakovinou (PleSSision-Rapid®) pomocí vzorků shromážděných TURP. Byla zjištěna ko-delecce RB1 a BRCA2 a také zkrácená mutace TP53 (G244Rfs*19). Byla zjištěna amplifikace genu androgenového receptoru (AR) s odhadovaným počtem kopií 18,3. Kromě toho byla zjištěna bodová mutace patched 1 (PTCH1) (p.R441H) jako možná patogenní změna. Immunohistochemické zbarvení bylo provedeno pomocí standardních protokolů. Produkty protilátek a podrobné protokoly jsou uvedeny v doplňujícím souboru. Všechny zbarvené sekce byly naskenovány pomocí digitálního skeneru snímků s vysokým rozlišením (NanoZoomer-XR C12000; Hamamatsu Photonics, Hamamatsu, Shizuoka, Japonsko), který se skládal z kamerového senzoru s třemi liniemi, detektoru s 4096 × 64 řádky × 3 deskami a filtru, který se dělí pouze na RGB s hranolem. Měřené rozlišení všech mikroskopických snímků bylo 0,23 μm/pixel, což odpovídalo 40 × objektivu. Barvení hematoxylinem a eosinem ukázalo, že nádorové buňky měly jasné nukleoly a histologický vzhled se lišil od typických buněk neuroendokrinní rakoviny prostaty (obr. ). Úplná absence exprese proteinů RB1 a p53 (Další soubor: obr. S1A–B) odpovídala genomickým nálezům. AR bylo obarveno v 70 % nádorových jader a PSA byla pozitivní v přibližně 30 % nádorových buněk (Další soubor: obr. S1C–D), zatímco neuroendokrinní markery nebyly obarveny (Další soubor: obr. S1E–G). Immunohistochemické zbarvení gliomem asociovaného onkogenního zinkového prstu 1 (GLI1) bylo provedeno, aby se potvrdilo, zda byl hedgehog signál v našem případě zesílen mutací PTCH1. GLI1-pozitivní nádorové buňky představovaly méně než 10 % z celkového počtu (Další soubor: Obr. S1H) a zbarvení buněk v jádře nebylo silnější než u Leydigových buněk použitých jako pozitivní kontrola (údaje nejsou uvedeny), což naznačuje, že hedgehog signál nebyl zesílen.