Un home de 61 anys, anteriorment sa, va visitar un metge local amb una queixa principal d'una massa al cap. Va ser derivat al departament de neurocirurgia del nostre hospital per sospita d'un tumor al crani. Es va realitzar una ressonància magnètica del cap amb un dispositiu de 3 T (GE DISCOVERY MR750; GE Healthcare) amb un agent de contrast basat en gadolini, i es va sospitar un tumor metastàtic. L'examen de sang va mostrar un alt nivell d'antigen específic de la pròstata de 165,42 ng/mL, i una tomografia computada va detectar lesions lítiques de l'os pèlvic adjacent a la pròstata anormalment engrandida.. L'escintigrafia òssia amb 99mTc-hidroximetilè difosfat va revelar múltiples metàstasis òssies a tot el cos. El pacient va ser derivat al nostre departament per sospita de múltiples metàstasis òssies del càncer de pròstata. Una biòpsia amb agulla de la pròstata del pacient va revelar un adenocarcinoma amb una puntuació de Gleason de 5 + 4 = 9, que va provocar l'inici de l'ADT. Un any després de l'inici de l'ADT es va observar un augment del nivell d'antigen específic de la pròstata i una insuficiència postrenal a causa de la retenció urinària, i es va realitzar una resecció transuretral del canal de la pròstata (TURP). Es va administrar docetaxel durant un total de set cicles perquè es va considerar que el tumor del pacient havia adquirit resistència a la castració. Tot i això, es van exacerbar múltiples metàstasis en els ganglis limfàtics i en els ossos. Tot i que ja s'havien administrat un total de sis cicles de cabazitaxel, es va interrompre a causa d'una infecció per úlcera de pressió sacral i el deteriorament de l'estat general del pacient. Es va tractar posteriorment amb abiraterona, però va morir 2 anys i 6 mesos després d'haver estat diagnosticat amb càncer de pròstata utilitzant mostres recollides per TURP. Es va detectar la co-delecció de RB1 i BRCA2 així com una mutació de truncament de TP53 (G244Rfs*19). Es va observar l'amplificació del gen del receptor d'andrògens (AR) amb un nombre de còpies estimat de 18.3. A més, es va detectar una mutació puntual de patched 1 (PTCH1) (p.R441H) com una possible alteració patogènica. Es va realitzar una tinció immunohistoquímica utilitzant protocols estàndards. Els productes dels anticossos i els protocols detallats es mostren al fitxer addicional. Es van escanejar totes les seccions tenyides utilitzant un escàner de diapositives digital d'alta resolució (NanoZoomer-XR C12000; Hamamatsu Photonics, Hamamatsu, Shizuoka, Japó), que consistia en una càmera de sensors trilineal, un detector de 4096 píxels × 64 línies × 3 plaques, i un filtre que només es divideix en RGB amb un prisma. La resolució mesurada de totes les imatges de microscòpia va ser de 0,23 μm/píxel, que va ser equivalent a 40 × l'objectiu. La tinció amb hematoxilina i eosina va mostrar que les cèl·lules tumorals tenien nuclèols clars i una histologia diferent de la de les cèl·lules canceroses neuroendocrines típiques de la pròstata per confirmar si el senyal de hedgehog s'havia potenciat per una mutació de PTCH1 en el nostre cas. Les cèl·lules tumorals GLI1-positives representaven menys del 10% del total (arxiu addicional: Fig. S1H) i la tinció nuclear de les cèl·lules no era més forta que la de les cèl·lules de Leydig utilitzades com a control positiu (dades no mostrades), la qual cosa indica que el senyal de hedgehog no s'havia potenciat.